鹽脅迫下番茄LeENH1基因的功能分析.pdf

1、鹽脅迫是影響植物生長(zhǎng)并造成農(nóng)作物減產(chǎn)的主要環(huán)境因素之一。鹽脅迫造成Na+在細(xì)胞質(zhì)中大量積累的同時(shí)也往往導(dǎo)致K+的流失。K+參與很多細(xì)胞生理過程，如酶活性調(diào)節(jié)，蛋白折疊，滲透調(diào)節(jié)。過量的Na+會(huì)導(dǎo)致光合作用下降和光系統(tǒng)Ⅱ的光抑制，此外，葉綠體內(nèi)的活性氧自由基(ROS)大量產(chǎn)生，質(zhì)膜過氧化加劇。
　　 SOS途徑在植物耐鹽脅迫的過程中具有重要的作用，ENH1參與一個(gè)新的鹽脅迫響應(yīng)途徑，SOS2蛋白和類似SOS3的蛋白參與這個(gè)新的途徑

2、。但是ENH1對(duì)離子平衡的重新建立、光合作用的影響和ROS的清除機(jī)理仍不清楚。在本項(xiàng)研究中，我們克隆了番茄的ENH1基因，并在煙草中過表達(dá)該基因，研究了LeENH1功能，主要結(jié)果如下:
　　 (1)利用GFP蛋白亞細(xì)胞定位分析，證明LeENH1的產(chǎn)物定位于葉綠體。利用實(shí)時(shí)定量PCR(qRT-PCR)分析表明，LeENH1在葉片中表達(dá)量最多，根中表達(dá)量最少，莖、花和果實(shí)中表達(dá)量較低。葉片中LeENH1受NaCl的誘導(dǎo)上調(diào)表達(dá)。

3、r>　　 (2)獲得轉(zhuǎn)正義LeENH1基因煙草植株，鹽脅迫下LeENH1過表達(dá)的煙草種子發(fā)芽率，幼苗的鮮重和干重比野生型高。轉(zhuǎn)基因煙草葉片葉綠素含量、光合速率和最大光化學(xué)效率均比野生型高，這說明過表達(dá)LeENH1可以減輕鹽脅迫對(duì)光合機(jī)構(gòu)的破壞。
　　 (3)在鹽脅迫下，過表達(dá)LeENH1增強(qiáng)Na+排除細(xì)胞外和區(qū)域化積累到液泡中，并保持大量K+在細(xì)胞質(zhì)中，從而建成新細(xì)的胞內(nèi)離子平衡。
　　 (4)煙草幼苗染色顯示，轉(zhuǎn)基因