綠色木霉菌代謝物的分離純化及其抑菌活性的研究.pdf

1、本文以常見的綠色木霉菌為材料，對(duì)其代謝物進(jìn)行了細(xì)致的研究，主要內(nèi)容包括對(duì)其抑菌活性，培養(yǎng)基的優(yōu)化，代謝物的穩(wěn)定性，代謝物的分離純化，分離純化后單體化合物的抑菌活性的研究，旨在開發(fā)一種高效、穩(wěn)定的生物制劑，來代替化學(xué)殺菌劑在果蔬采后病害中的防治。
　　 研究了綠色木霉菌對(duì)單糖、二糖、多糖以及有機(jī)氮源、無機(jī)氮源和氨基酸的利用率。結(jié)果發(fā)現(xiàn)，在碳源中，綠色木霉對(duì)半乳糖的利用率最高，對(duì)蔗糖的利用率最低，對(duì)乳糖、海藻糖、木糖、果糖、甘露糖、

2、葡萄糖等均有較好的利用率；對(duì)于氮源，綠色木霉菌對(duì)有機(jī)氮源和氨基酸的利用率要顯著高于無機(jī)氮源。
　　 在土豆含量、發(fā)酵天數(shù)、裝液量等單因素試驗(yàn)的基礎(chǔ)上，根據(jù)CentralComposite Design試驗(yàn)設(shè)計(jì)原理，應(yīng)用響應(yīng)面分析法研究各因素的顯著性和交互作用的強(qiáng)弱，對(duì)綠色木霉菌代謝抑菌物質(zhì)的培養(yǎng)條件進(jìn)行優(yōu)化。結(jié)果表明，綠色木霉菌代謝抑菌物質(zhì)的優(yōu)化培養(yǎng)條件為土豆含量20％、發(fā)酵天數(shù)4.5d、裝液量67mL/250mL，實(shí)際抑菌率達(dá)

3、到83.03％，與理論預(yù)測(cè)值81.89％的絕對(duì)誤差為1.14％。
　　 在綠色木霉菌培養(yǎng)基和培養(yǎng)條件優(yōu)化的基礎(chǔ)上，研究綠色木霉代謝物對(duì)根霉、黑曲霉、芒果炭疽菌、荔枝炭疽菌、尖孢鐮刀菌及青霉菌等五種果蔬采后病原菌的抑制作用，發(fā)現(xiàn)其對(duì)芒果炭疽菌的抑制作用最強(qiáng)，抑菌率達(dá)到84.32％。在對(duì)綠色木霉代謝物穩(wěn)定性的研究中發(fā)現(xiàn)，其對(duì)熱、光、微波較為穩(wěn)定；pH6-7時(shí)穩(wěn)定；Cu2+、Fe3+對(duì)代謝物的影響較大，防腐劑、氧化劑、還原劑在一定濃度

4、范圍內(nèi)對(duì)其影響不顯著。
　　 對(duì)綠色木霉代謝物進(jìn)行溶劑萃取，并分別對(duì)石油醚相、乙酸乙酯相、正丁醇相的抑菌活性進(jìn)行了研究。結(jié)果發(fā)現(xiàn)，抑菌活性大小為：石油醚相>乙酸乙酯相>正丁醇相。
　　 石油醚部分采用氣質(zhì)聯(lián)用儀分離出29個(gè)化合物，鑒定出其中的5個(gè)化合物：2，3-二甲基-2-戊醇、桉葉醇、苯乙醇、鄰苯二甲酸二異丁酯、Sohirnone B。本文采用多種常壓柱層析，包括正相硅膠、反相Rp-18硅膠、葡聚糖凝膠sephadex

5、LH-20，從綠色木霉代謝物的乙酸乙酯相中分離了三個(gè)化合物，并運(yùn)用NMR等光譜學(xué)方法對(duì)其進(jìn)行了鑒定：2，4-己二烯酸乙酯、Bisvertinolone、Viridenepoxydiol。
　　 對(duì)分離出的2，4-己二烯酸乙酯、Bisvertinolone、Viridenepoxydiol三個(gè)單體化合物進(jìn)行了抑菌活性的研究。發(fā)現(xiàn)2，4-己二烯酸乙酯、Bisvertinolone化合物對(duì)荔枝炭疽菌均有抑制作用，Viridenepox