不同輔助孵化方式對小鼠囊胚孵化率的影響.pdf

1、輔助孵化(Assisted Hatching，AH)是一種能夠幫助胚胎從透明帶中孵出的技術(shù)。體外受精-胚胎移植（in vitro fertilization-embryo transfer，IVF-ET）過程中的著床率低下現(xiàn)象，一直是困擾人們的問題。臨床上，運用AH技術(shù)能夠有效提高囊胚孵化率以及胚胎著床率。目前，人工輔助孵化的方法主要有機(jī)械法、化學(xué)法、酶消化法、激光法以及壓電脈沖(piezo)顯微操作法。AH的具體操作方法包括對卵母細(xì)胞

2、的透明帶進(jìn)行打孔或削薄等方法，進(jìn)行輔助孵化處理時所選擇的胚胎發(fā)育時期也各不相同。然而，究竟哪種AH方法最有效，選擇哪一發(fā)育時期的胚胎進(jìn)行AH操作能夠得到最理想的效果，還沒有具體研究。本實驗利用piezo顯微操作法，針對小鼠成熟卵母細(xì)胞及著床前各時期胚胎進(jìn)行不同方式的AH處理，統(tǒng)計各種方法處理后胚胎的發(fā)育率和囊胚的孵化率，以探明最佳的AH處理方式。
　　本研究采用的AH方法分別為：透明帶打小孔(small hole，SH)，開孔長度

3、約為10μm；透明帶打大孔（large hole，LH），開孔長度約為50μm；透明帶削薄小區(qū)域(small length thinner，ST)，削薄區(qū)域直徑約為50μm；透明帶削薄大區(qū)域（large length thinner，LT），削薄區(qū)域直徑約為120μm。選擇不同發(fā)育時期的卵母細(xì)胞或胚胎分別進(jìn)行AH處理，各時期分別為：MⅡ期卵母細(xì)胞；IVF體外培養(yǎng)得到的2-cell胚胎；IVF體外培養(yǎng)得到的4-cell胚胎；IVF體外培養(yǎng)