腹腔巨噬細胞對小鼠卵受精率和囊胚形成率的影響.pdf

1、中國協(xié)和醫(yī)科大學碩士學位論文腹腔巨噬細胞對小鼠卵受精率和囊胚形成率的影響姓名：陳梅申請學位級別：碩士專業(yè)：婦科生殖內(nèi)分泌指導教師：郁琦20060501中國協(xié)和醫(yī)科大學中國醫(yī)學科學院 傾十學位論文中文摘要腹腔巨噬細胞對小鼠卵受精率和囊胚形成率的影響近年來子宮內(nèi)膜異位癥( e n d o m e t r i o s i S ，E M ) 發(fā)病率不斷上升，約5 ％～1 5 ％的育齡期婦女受其影響，其與不育癥的關(guān)系日益成為研究的熱點，但其病因與

2、發(fā)病機制尚未完全闡明，E M 患者分泌的腹腔液增多，腹腔液中巨噬細胞數(shù)量增多、功能增強，腹腔液和血清中由巨噬細胞分泌的細胞因子也明顯增多，且與病變程度成難比。這些與不育是否有關(guān)、關(guān)系如何，目前尚不十分清楚。國內(nèi)外的研究對巨噬細胞對囊胚形成的作用意見不一致。本研究擬通過建立小鼠體外受精模型，觀察巨噬細胞對小鼠卵子受精率和囊胚形成率的影響。研究目的一．建立小鼠體外受精模型二．巨噬細胞對小鼠卵子受精率和囊胚形成率的影響1 ．分離、培養(yǎng)及鑒定小

3、鼠腹腔巨噬細胞；2 ．昆明小鼠精子提??；3 ．昆明小鼠的藥物誘導排卵；4 ．昆明小鼠的取卵；5 ．小鼠卵子與巨噬細胞體外共培養(yǎng)，觀察其對小鼠卵受精率和囊胚形成率的影響。研究方法1 ．觀察小鼠不同周齡( < 8 周，8 周～1 0 周，1 0 ～1 4 周和) 1 4 周) ，不同體重( ( 3 2 克，3 2 克～4 0 克和) 4 0 克) ，以及促排卵藥物不同劑量( 5 I U 、I O I U 和1 5 I U ) 和不同狀

4、態(tài)( 冷凍還是新鮮) 下，所取出鼠卵的數(shù)量和質(zhì)量，確定最佳的小鼠狀態(tài)和藥物劑量建立昆明小鼠體外誘導排卵模型。2 ．利用冰鹽水對小鼠進行腹腔內(nèi)注射，誘導腹腔巨噬細胞產(chǎn)生，經(jīng)分離純化，通過鑒定證明收獲細胞約9 5 ％為巨噬細胞備用。3 ．通過設立實驗組和對照組，取卵后隨機把卵分成三組：①對照組，進行小鼠卵子單獨培養(yǎng)，培養(yǎng)過程中不與巨噬細胞共培養(yǎng)；o 實驗組1 ：取卵后即與巨噬細胞進行共培養(yǎng)，觀察巨噬細胞作為共培養(yǎng)體系對小鼠卵子受精率和囊胚形