外周血內(nèi)皮祖細(xì)胞數(shù)量及動(dòng)脈內(nèi)皮型一氧化氮合酶基因表達(dá)在動(dòng)脈粥樣硬化大鼠中的改變.pdf

1、背景：
　　 動(dòng)脈粥樣硬化(athcrosclcrosis,AS)是導(dǎo)致如心肌梗死、腦卒中等嚴(yán)重心腦血管疾病的重要病理基礎(chǔ),在我國(guó)的發(fā)病率正在逐年上升,嚴(yán)重威脅人類(lèi)健康。內(nèi)皮祖細(xì)胞(endothelial progenitorcells,EPCs)是血管內(nèi)皮細(xì)胞的前體細(xì)胞,血管內(nèi)皮細(xì)胞損傷和功能障礙是動(dòng)脈粥樣硬化發(fā)生的初始環(huán)節(jié)。內(nèi)皮祖細(xì)胞具有趨向性,能夠自我更新和增殖分化,在損傷的內(nèi)皮細(xì)胞增殖和修復(fù)過(guò)程中起重要作用,可以定向分化

2、為內(nèi)皮細(xì)胞和修復(fù)損傷的內(nèi)皮細(xì)胞,而內(nèi)皮損傷和修復(fù)的平衡在減少動(dòng)脈粥樣硬化方面起重要作用。最基本的病理特點(diǎn)是:病變從動(dòng)脈內(nèi)膜開(kāi)始,經(jīng)過(guò)脂質(zhì)聚集、出血、血栓形成等過(guò)程,使動(dòng)脈內(nèi)膜呈斑塊狀增厚,導(dǎo)致EPCs的數(shù)量和功能異常,eNOS表達(dá)下調(diào),損傷的動(dòng)脈內(nèi)皮未得到足夠的修復(fù),打破了動(dòng)脈內(nèi)皮損傷和修復(fù)的平衡,使動(dòng)脈內(nèi)膜呈斑塊狀增厚,進(jìn)而管壁增厚變硬,失去彈性和管腔縮小,從而導(dǎo)致了動(dòng)脈粥樣硬化的形成。
　　 一氧化氮合成酶(nitric o

3、xide synthase,NOS)廣泛分布于體內(nèi),其中以?xún)?nèi)皮細(xì)胞型一氧化氮合酶(endothelial nitric oxide synthase,eNOS)最為重要。eNOS是反應(yīng)內(nèi)皮功能的酶,決定著一氧化氮生成,eNOS誘生的NO為內(nèi)皮舒血管物質(zhì),具有重要的生理學(xué)效應(yīng),如:調(diào)節(jié)血壓、維持血管張力,抑制血小板凝集和粘附、抑制平滑肌細(xì)胞的遷移和增生、調(diào)節(jié)影響心肌收縮與舒張作用等。有研究表明,eNOS產(chǎn)生的一氧化氮減少將導(dǎo)致內(nèi)皮細(xì)胞功能

4、異常,最終可能導(dǎo)致動(dòng)脈粥樣硬化的產(chǎn)生。因此,EPCs和eNOS可能參與動(dòng)脈粥樣硬化的發(fā)生和發(fā)展,已成為目前研究的熱點(diǎn)。
　　 但是動(dòng)脈粥樣硬化的發(fā)生與發(fā)展的病理生理機(jī)制迄今尚未完全闡明。大量研究表明,動(dòng)脈粥樣硬化既是一種炎癥性疾病,又是多基因、多環(huán)境因素共同作用的結(jié)果。在既往的研究中,關(guān)于內(nèi)皮祖細(xì)胞與AS的機(jī)制研究較少,而關(guān)于內(nèi)皮型一氧化氮合酶與AS的機(jī)制研究更少。
　　 目的：
　　 探討外周血內(nèi)皮祖細(xì)胞(EP

5、Cs)數(shù)量及動(dòng)脈一氧化氮合酶(eNOS)基因表達(dá)與大鼠動(dòng)脈粥樣硬化的關(guān)系,并探討其可能的機(jī)制。
　　 方法：
　　 大鼠分3組:G1組為正常對(duì)照組,采用假手術(shù)+普通飼料喂養(yǎng)(n=20);G2組為實(shí)驗(yàn)對(duì)照組,采用假手術(shù)+高脂飼料喂養(yǎng)(n=20);G3組為動(dòng)脈粥樣硬化組,采用球囊損傷腹主動(dòng)脈內(nèi)皮和飼以高脂飼料喂養(yǎng)(n=30),90d后分別抽出外周血進(jìn)行EPCs的分離、培養(yǎng),于倒置相差顯微鏡下計(jì)數(shù)內(nèi)皮祖細(xì)胞克隆形成單位(EPC

6、-CFU),,并采用Real-time PCR法檢測(cè)腹主動(dòng)脈中eNOS基因的表達(dá),并計(jì)算其相對(duì)表達(dá)量。
　　 結(jié)果：
　　 1、與G1組相比,外周血內(nèi)皮祖細(xì)胞數(shù)量在G2組無(wú)明顯變化,無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)差異(P＞0.05),在G3組顯著減少(P＜0.01),G3組較G2組內(nèi)皮祖細(xì)胞數(shù)量明顯減少(P＜0.01);
　　 2、與G1組相比,內(nèi)皮型一氧化氮合酶基因表達(dá)在G2組無(wú)明顯下調(diào),無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)差異(P＞0.05),在G3組顯著下