一例急性間歇性卟啉病的家系調(diào)查及文獻(xiàn)復(fù)習(xí).pdf

1、背景及目的:
　　 急性間歇性卟啉病(AcuteIntermittentPorphyria，AIP)是一種常染色體顯性遺傳病，是由于亞鐵血紅素生物合成過(guò)程中編碼羥甲基膽素合成酶的基因(hydroxymethylbilanesynthase，HMBS，EC4.3.1.8)變異致酶活性下降引起的。體內(nèi)卟啉前體δ-氨基-ly-酮戊酸（aminolevulinicacid，ALA）和膽色素原（porphobilinogen，PBG）會(huì)大

2、量積累，導(dǎo)致尿液中ALA和PBG的水平升高。在月經(jīng)來(lái)潮、藥物、壓力等誘因下出現(xiàn)腹痛、神經(jīng)系統(tǒng)和心血管等相關(guān)癥狀，急性期甚至可以引起呼吸肌麻痹而致死。
　　 迄今為止，一共發(fā)現(xiàn)了HMBS基因的300多個(gè)突變類(lèi)型，包括錯(cuò)義、無(wú)義、插入、重復(fù)、缺失等。對(duì)存在突變的HMBS基因產(chǎn)物進(jìn)行酶活性檢測(cè)，發(fā)現(xiàn)部分突變后HMBS的酶活性明顯下降。到目前為止，國(guó)外已有大量關(guān)于AIP家系基因突變的報(bào)道，然而在國(guó)內(nèi)，關(guān)于該病分子機(jī)理方面的研究報(bào)道僅有1

3、例，卻未找到相應(yīng)突變位點(diǎn)。本研究通過(guò)對(duì)一例急性間歇性卟啉病患者及其家系進(jìn)行臨床及分子生物學(xué)研究，以期了解該家系HMBS基因的突變位點(diǎn)，為家系中攜帶突變基因的潛在發(fā)病者提供預(yù)防建議。
　　 方法:
　　 患者為28歲女性，漢族人，以“腹痛6天，突發(fā)肢體抽搐伴意識(shí)障礙7小時(shí)”為主訴，于2010年7月17日入大連醫(yī)科大學(xué)附屬第一醫(yī)院，查尿色略加深，在陽(yáng)光下曝曬10h后，尿液可迅速變?yōu)榧t色，尿PBG（-），尿膽紅素(+)，尿膽原

4、（±）。其大姑母26歲時(shí)出現(xiàn)與月經(jīng)、懷孕相關(guān)的腹痛，查PBG(+)，診斷為AIP，誘因?yàn)樵陆?jīng)來(lái)潮，為先證者。其父親40歲時(shí)因工作壓力大出現(xiàn)胃部疼痛，伴尿色變紅，但未就診自行緩解。患者具有典型AIP臨床癥狀，且家族史明確，AIP診斷明確。采集患者家系中父親、母親、2個(gè)姑母、1個(gè)叔叔、2個(gè)表弟和1個(gè)堂妹的外周血，提取基因組DNA，共設(shè)計(jì)9對(duì)引物，通過(guò)聚合酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)(PCR)技術(shù)擴(kuò)增HMBS基因的15個(gè)外顯子序列，測(cè)序后通過(guò)Mega5.0軟件

5、對(duì)外顯子堿基序列和氨基酸序列進(jìn)行比對(duì)分析，篩查突變位點(diǎn)。
　　 結(jié)果:
　　 患者及其父親、小姑母的兒子、先證者均于Exon10發(fā)現(xiàn)R173W(517C＞T)突變，編碼氨基酸由精氨酸變成了色氨酸;先證者同時(shí)于Exon15發(fā)現(xiàn)突變H305N(1070C＞A)，編碼氨基酸由組氨酸變成天冬酰胺;患者母親于Exon15發(fā)現(xiàn)突變R321L(1119G＞T、1120T＞A)，編碼氨基酸由精氨酸變成亮氨酸。所有研究對(duì)象均于Exon1非

6、編碼區(qū)發(fā)現(xiàn)突變93C＞T;患者父親同時(shí)發(fā)現(xiàn)突變6delA，因兩種突變均位于非編碼區(qū)，不表達(dá)蛋白質(zhì)，為無(wú)義突變。患者小姑母及其兒子、叔叔及其女兒均于Exon3發(fā)現(xiàn)突變223C＞T，但編碼氨基酸不變，仍為精氨酸，為無(wú)義突變?；颊叩母赣H、小姑母均于Exon10發(fā)現(xiàn)突變763G＞T，但編碼氨基酸不變，仍為纈氨酸，為無(wú)義突變。
　　 結(jié)論:
　　 1.患者HMBS基因Exon10發(fā)現(xiàn)517位堿基由C突變成T(517C＞T)，使得1

7、73位氨基酸由精氨酸變成了色氨酸(R173W)，為雜合突變，該突變遺傳自其父親;同時(shí)先證者及其兒子亦發(fā)現(xiàn)了此突變。
　　 2.R173W突變既往曾在多個(gè)國(guó)家的家系中報(bào)道過(guò)，而在我國(guó)尚屬首例報(bào)道。與其他突變相比，此突變更能影響HMBS的活性，導(dǎo)致AIP急性發(fā)病期的臨床癥狀更加嚴(yán)重，且外顯率高。先證者的兒子目前尚未發(fā)病，但攜帶此突變基因，應(yīng)避免各種誘發(fā)因素，預(yù)防AIP急性發(fā)作。
　　 3.先證者同時(shí)于Exon15發(fā)現(xiàn)突變H3