短距風蘭快速繁殖及原球莖增重培養(yǎng)動力學研究.pdf

1、以短距風蘭(Neofinetia richardsiana)的種子為外植體,篩選了種子無菌萌發(fā)、原球莖增重、原球莖分化和小苗生根的適宜培養(yǎng)基；比較了不同的煉苗處理、基質消毒方式及基質配比對試管苗移栽成活率的影響；測定了原球莖增重培養(yǎng)的動力學參數(shù)；觀察了種子萌發(fā)的形態(tài)學過程。結果表明:
　　 種子無菌萌發(fā)的適宜培養(yǎng)基為1／2 B5+6-BA.1.0 mg L-1+NAA0.2 mg L-1,萌發(fā)率為71.67％；原球莖增重懸浮培養(yǎng)

2、的適宜培養(yǎng)基為B5+6-BA1.5 mg L-1+NAA0.5 mg L-1,絕對生長速度為260％；原球莖分化的適宜培養(yǎng)基為MS+NAA0.2 mg·L-1+6-BA1.0 mg·L-1+0.15％AC,分化率為87.5％；生根的適宜培養(yǎng)基為1／2 MS+IBA0.3 mg L-1+NAA0.5 mg L-1,生根率達100％。室內(nèi)煉苗2d室外煉苗3 d達到的煉苗效果較好,移栽成活率可達86％。用1000倍多菌靈浸泡基質5 min,基

3、質配比為樹皮:苔蘚:火山石=2:1:1,移栽成活率高,可達90％。
　　 原球莖的生長量變化曲分為下面幾個階段:0-6 d為延滯期；6-12 d為生長期；12-14 d為穩(wěn)定期；14-16 d為靜止期。在培養(yǎng)周期內(nèi),第8 d時蔗糖含量迅速降低為9.17 g·L-1,果糖含量逐漸上升,培養(yǎng)后期果糖消耗較快,總糖在生長過程中呈緩慢下降趨勢；磷酸鹽在培養(yǎng)的前6 d呈下降的趨勢,然后有一個回升的過程,從第10 d以后緩慢降低；銨態(tài)氮在培

4、養(yǎng)的第6 d急劇下降為60.21 mg·L-1,第16 d時消耗至19.63 mg·L-1；與銨態(tài)氮相比,硝態(tài)氮的變化比較緩慢,在培養(yǎng)的整個過程中逐漸降低；在培養(yǎng)周期的第8 d,pH逐漸降低到3.7,并在培養(yǎng)的后期有緩慢上升,第16 d時pH值維持在3.9左右。
　　 種子在播種后的第10 d,部分種子吸水膨脹,在第15 d時,種皮呈絲狀脫落,多數(shù)種子開始萌發(fā),在第20 d時,部分種子形成原球莖,在25 d時,種子大量形成原球莖