鐵棍山藥類原球莖誘導(dǎo)增殖及植株再生的研究.pdf

1、鐵棍山藥(DioscoreaoppositaThunb.cv.Tiegun)是我國特有的一個(gè)山藥種質(zhì)資源，是懷山藥中一個(gè)優(yōu)良的品種。它具有增強(qiáng)人體免疫力、降糖降脂、抗衰老等功能。傳統(tǒng)的繁殖方法和途徑繁殖速度慢，為了解決這個(gè)問題，本課題對鐵棍山藥類原球莖繁殖這一新途徑進(jìn)行了系統(tǒng)的研究，探討了其誘導(dǎo)形成、繼代增殖、植株再生過程中的關(guān)鍵技術(shù)，并對其形態(tài)發(fā)生發(fā)育的階段進(jìn)行了劃分。結(jié)果如下:
　　 1.帶腋芽莖段是誘導(dǎo)鐵棍山藥類原球莖的適

2、宜外植體，誘導(dǎo)的適宜培養(yǎng)基為MS+TDZ1.0mg/L+蔗糖30g/L。誘導(dǎo)類原球莖外植體類型的選擇上，與帶節(jié)點(diǎn)莖段、不帶節(jié)莖段、葉片相比，帶腋芽莖段誘導(dǎo)出的類原球莖數(shù)量較多，整齊度高。適宜濃度的TDZ是誘導(dǎo)類原球莖的關(guān)鍵，TDZ1.0mg/L時(shí)誘導(dǎo)效果最好。蔗糖、葡萄糖、果糖和甘露醇四種碳源中，蔗糖是誘導(dǎo)類原球莖的適宜碳源。
　　 2.鐵棍山藥類原球莖繼代增殖的適宜培養(yǎng)基為MS+6-BA9mg/L+Vc50mg/L+葡萄糖30

3、g/L，適宜培養(yǎng)方式為固體靜置光照培養(yǎng)。適宜濃度的6-BA對類原球莖的繼代增殖效果較好，濃度為9mg/L;增殖適宜的碳源為葡萄糖，濃度為30g/L;降低MS培養(yǎng)基中無機(jī)鹽的含量不利于類原球莖的增殖;通過添加KT、NAA、2，4-D與Vc的正交試驗(yàn)，發(fā)現(xiàn)繼代增殖培養(yǎng)基中只添加50mg/LVc，類原球莖增殖效果最好。
　　 3.鐵棍山藥類原球莖分化成苗及再生植株快繁的適宜培養(yǎng)基為MS+KT2mg/L+NAA0.02mg/L+蔗糖30

4、g/L，再生植株適宜的生根培養(yǎng)基為1/4MS+NAA0.05mg/L+PP3331.0mg/L+蔗糖15g/L，適宜的培養(yǎng)方式均為液體靜置光照培養(yǎng)。再生植株在生根培養(yǎng)基上42d后可形成根系發(fā)達(dá)生長健壯的試管苗，將其移栽入蛭石中進(jìn)行煉苗，期間適當(dāng)澆營養(yǎng)液，30d后移栽成活率可達(dá)85％。
　　 4.鐵棍山藥類原球莖形態(tài)發(fā)生發(fā)育階段劃分為六個(gè)階段:Ⅰ.外植體時(shí)期;Ⅱ.初生類原球莖時(shí)期;Ⅲ.次生類原球莖時(shí)期;Ⅳ.三生類原球莖類原球莖時(shí)期