胸膜肺炎放線桿菌的STM突變體庫的構(gòu)建及l(fā)uxS基因的結(jié)構(gòu)與功能研究.pdf

1、分類 號華 中農(nóng)業(yè)大學(xué)碩士學(xué)位論文胸膜肺炎放線桿菌 的 ST M 突變體庫 的構(gòu)建及 /“ 萬 S 基 因的結(jié)構(gòu) 與功 能研 究C o n stru ctio no fS T MM u ta n tss n dS tru etu rea n dF u n e tio n a lSt u d yo f l川 召 G e n eo f A c ti n o b a c il usP te u 矛 歲 P n e u m o n ia e研

2、究 生 : 黎 璐指 導(dǎo) 教 師 : 陳煥春 教授指 導(dǎo) 小 組 : 陳煥春 教授周 銳 教授專業(yè) : 預(yù) 防獸 醫(yī)學(xué)獲得 學(xué)位 名稱 : 農(nóng)學(xué)碩 士研 究方 向: 動(dòng)物傳染病獲得 學(xué)位 時(shí)間 : 2008 年 6 月華 中農(nóng)業(yè)大學(xué)動(dòng)物 醫(yī)學(xué) 院二 0 0 八 年 六 月胸膜肺 炎放線桿菌 的 ST M 突變體庫 的構(gòu)建及 Z 以S 基因的結(jié)構(gòu)與功能研究目 錄摘 要 二 ， . . . . . . . . . . … …， . . .

3、. . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . ……1A B S T R A C T .....

4、.. ... .. ... ............. .. ... ................ .. .......... .. ... ................ ... .. .......... .. .......... .....…… 2第一章 文獻(xiàn)綜述 . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . .

5、. . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . … …61. 1豬傳染性胸膜肺炎概述 . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . … … ，

6、 . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . … …61. 1. 1 豬傳染性胸膜肺炎的危害 . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . .

7、 . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . … …61. 1. 2 豬傳染性 胸膜肺 炎 的病原學(xué) . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . … …61.

8、1. 3 胸膜肺 炎放線桿菌 的致病機(jī)理研 究進(jìn) 展 . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . … …71. 2 ST M 技 術(shù)概述 . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . .

9、 . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . ……101. 2. 1ST M 技術(shù) 原理 . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . .

10、 . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . … … 101. 2. 2ST M 技術(shù) 的應(yīng) 用 . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . …

11、 …， . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . …… 121. 3 1 袱S 基 因的功 能概述 . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . .

12、 . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . … …131. 3.1 細(xì)菌 的群體感應(yīng)機(jī)制 . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . .

13、. . . . . . . . . . . . . … … 131. 3. 2 A I一 2 型群體感應(yīng)機(jī)制 . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . … …

14、 141. 3. 3L ux S 在 A l 一 2 生物合成 中的作用 . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . … … 161. 3. 4 A I一 2 分子 的結(jié)構(gòu) . . . . . . . . . . . . . . . .

15、 . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . …… 181. 3. 5L ux S 的功 能基序 . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . .

16、 . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . … … 181. 3. 6L uxS/A I一 2 的功 能研 究進(jìn)展 . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . … … ， . . . . . .

17、 . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . … … 19第二章 膜肺炎放線桿菌 ST M 突變體庫 的構(gòu)建 . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . … …222.

18、1 目的及意義 . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . … …222

19、. 2 材料與方法 . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . … …2

20、22. 2. 1 菌株 、質(zhì)粒及培養(yǎng)條件 . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . … …222. 2. 2 酶和試 劑 . . . . . . . . . . . . . .

21、. . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . ……222. 2. 3P C R 引物 . . . . . . . . . . . . . .

22、. . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . … …242. 2. 4 含有 幾g 的質(zhì) 粒 的提 取和 轉(zhuǎn)化 . . . . . . . .

23、 . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . ……242. 2. 5M at ing 法篩選突變體 . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . .

24、. . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . … …252. 2. 6 突變 體 的鑒 定 . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . .

25、 . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . ……262. 2. 7 突變體庫 的保存 . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . .

26、. . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . ……262. 3 結(jié) 果 與分 析 . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . .

27、. . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . ……， .262. 3. 1 含 有 Ta g 質(zhì)粒 的提取和 轉(zhuǎn)化鑒 定 . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . … …262. 3. 2 突變體 的

28、構(gòu)建和篩選鑒定 . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . … …272. 3. 3 分別含有 四個(gè) 幾g 的突變 體庫 的構(gòu)建和 保存 結(jié)果 . . . . . . . . . . . . .

29、. . . . . . . . . . . . . . . . . . . ……272. 3. 4 突 變 體庫 的質(zhì) 量 分析 . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . .