多色比率熒光探針檢測(cè)癌癥細(xì)胞提取液內(nèi)端粒酶活性.pdf

1、端粒酶是一種存在于真核細(xì)胞中的RNA-蛋白質(zhì)復(fù)合酶，具有能夠延長(zhǎng)細(xì)胞內(nèi)染色體末端的端粒序列的作用。端粒序列的長(zhǎng)度與細(xì)胞的分裂能力息息相關(guān)，由于細(xì)胞每復(fù)制一次，端粒序列會(huì)因?yàn)閺?fù)制機(jī)制的作用而縮短，當(dāng)縮短到一定程度時(shí)便會(huì)喪失分裂能力，但是在癌癥細(xì)胞中，由于端粒酶的活性較高，可以不斷延長(zhǎng)端粒序列的長(zhǎng)度，所以端粒酶被認(rèn)為是癌癥細(xì)胞可以永生化的一種重要原因。近些年，端粒酶被作為癌癥研究中的重要標(biāo)志物，被進(jìn)行了大量的應(yīng)用，包括癌癥診斷以及癌癥治療。

2、端粒酶的活性高低直接與癌癥細(xì)胞的分裂能力相關(guān)，因此大量關(guān)于端粒酶活性檢測(cè)的研究被報(bào)導(dǎo)出來(lái)。其中，熒光傳感器由于其快速，簡(jiǎn)便，高效，選擇性強(qiáng)等優(yōu)點(diǎn)，被大量應(yīng)用于端粒酶活性的檢測(cè)。但是單色熒光探針有著無(wú)法避免環(huán)境因素干擾，導(dǎo)致假陽(yáng)性信號(hào)的影響。因此，本論文設(shè)計(jì)出一種以寡核苷酸鏈為主體的多色比率熒光探針，可以在有效檢測(cè)端粒酶活性的同時(shí)，避免假陽(yáng)性信號(hào)的出現(xiàn)，同時(shí)也會(huì)根據(jù)端粒酶活性的高低，使熒光探針顯示出不同顏色的效果，可以達(dá)到簡(jiǎn)單的肉眼鑒別正

3、常細(xì)胞與幾種癌癥細(xì)胞的目的。本論文主要分為兩大章節(jié)。
　　第一章分為兩個(gè)部分，第一部分主要介紹了端粒序列和端粒酶的結(jié)構(gòu)和功能。同時(shí)還介紹了最早檢測(cè)端粒酶活性的傳統(tǒng)方法，以及近些年來(lái)報(bào)導(dǎo)的各種比較經(jīng)典的新型方法，同時(shí)針對(duì)每種方法的原理分析了它們?cè)跈z測(cè)方面的優(yōu)缺點(diǎn)。第二部分主要介紹了幾種經(jīng)典的比率熒光探針的類型，分析了其發(fā)光原理，舉例說(shuō)明了各種探針類型的結(jié)構(gòu)和應(yīng)用
　　第二章中主要介紹了多色比率熒光DNA探針檢測(cè)細(xì)胞提取液中端粒