TRPM7在治療性淺低溫(34℃)處理的大鼠離體心肌缺血再灌注模型中的作用及其與PI3K通路的關(guān)系.pdf

1、目的：
　　檢測TRPM7在治療性淺低溫（34℃）處理的大鼠離體心肌缺血再灌注模型中的作用，并探討在治療性淺低溫（34℃）中TRPM7與PI3K通路的關(guān)系。
　　方法：
　　SPF清潔級健康成年雄性SD大鼠（250-350g）108只（湖南斯萊克景達實驗動物有限公司提供），將其隨機分為6組（n=18）：對照組（SHAM），心肌缺血再灌注組（I/R），心肌缺血再灌注+TRPM7抑制劑2-APB組(I/R+2-APB)，3

2、4℃淺低溫缺血再灌注組（34H+I/R），34℃淺低溫缺血再灌注+PI3K抑制劑wortmannin組（34H+I/R+WORT），34℃淺低溫缺血再灌注組+TRPM7抑制劑2-APB（2-Aminoethoxydiphenyl borate，2-APB）組（34H+I/R+2-APB）。SHAM組：正常大鼠組，不做任何處理。I/R組：37℃灌流液平衡灌流大鼠心臟30min，缺血30min，37℃灌注液再灌注120min；I/R+2-A

3、PB組：37℃灌流液平衡灌流大鼠心臟30min，缺血30min，灌注液中加入TRPM7抑制劑2-APB后行37℃灌注液再灌注120min；34H+I/R組：37℃灌流液平衡灌流大鼠心臟30min，缺血30min，34℃灌注液再灌注120min；34H+I/R+WORT組：37℃灌流液平衡灌流大鼠心臟30min，缺血30min，在灌注液中加入PI3K抑制劑wortmannin后行34℃灌注液再灌注120min；34H+I/R+2-APB組

4、：37℃灌流液平衡灌流大鼠心臟30min，缺血30min，在灌注液中加入TRPM7抑制劑2-APB后行34℃灌注液再灌注120min；以壓力換能器連接Medlab生物信號采集系統(tǒng)記錄平衡灌流30 min末（T0，基礎(chǔ)值），再灌注30 min（T1），60 min（T2），90 min（T3），120 min（T4）各時間點的心率（HR）、左心室收縮壓（LVSP）、左心室舒張末壓（LVEDP）、左心室內(nèi)壓上升/下降最大速率（±dp/dt

5、max）。在再灌注120min末，取心臟進行免疫組化觀察TRPM7蛋白變化、western blot測定TRPM7蛋白含量，HE染色觀察心肌損傷，并測定TTC染色后的心肌梗死面積。
　　結(jié)果：
　　1、常溫下心肌缺血再灌注損傷后TRPM7的表達水平變化
　　（1）在I/R組中，TRPM7的表達量升高，與SHAM組有顯著性差異（P<0.05）；所形成的心肌梗死面積與 SHAM組比較明顯增多（52.74±1.25％ vs.

6、13.87±1.17%，P<0.05）；
　?。?）在I/R+2-APB組中，與I/R組比較，TRPM7表達量明顯減少（P<0.05）；所形成的心肌梗死面積（42.85±1.19%）與I/R組比較明顯減少（P<0.05）；
　　2、治療性淺低溫（34℃）在心肌缺血再灌注中對TRPM7的影響及其與PI3K通路的關(guān)系
　?。?）在34H+I/R組中，缺血再灌注損傷所造成的TRPM7高表達被逆轉(zhuǎn)，其TRPM7的表達量與I/R

7、組相比明顯減少（P<0.05）；所形成的心肌梗死面積與I/R組相比明顯減少（34.63±0.72%vs.52.74±1.25%，P<0.05）；
　?。?）在34H+I/R+WORT組中，治療性淺低溫（34℃）所導致的TRPM7表達降低作用被逆轉(zhuǎn)，其TRPM7表達量與34H+I/R組相比增多（P<0.05）；治療性淺低溫（34℃）所導致的心肌梗死面積減少作用被逆轉(zhuǎn)，其心肌梗死面積與34H+I/R組相比有所增加（34.63±0.72

8、%vs.48.89±0.52%，P<0.05）；
　?。?）在34H+I/R+2-APB組中，其 TRPM7表達量與34H+I/R組和34H+I/R+WORT組相比，TRPM7表達量減少（P<0.05）；所形成的心肌梗死面積（29.75±0.55%）與34H+I/R和34H+I/R+WORT組相比減少（P<0.05）。
　　3、各組之間血流動力學變化差異沒有統(tǒng)計學意義（P>0.05）。
　　結(jié)論：
　　1、在大鼠