高糖對人臍靜脈內(nèi)皮細胞腎素前體表達的影響及初步機制探討.pdf

1、腎素-血管緊張素系統(tǒng)（renin-angiotensinsystem，RAS）通過氧化應激、升壓、致血管炎癥和致內(nèi)皮功能紊亂等方式促進動脈粥樣硬化的形成，還與高血壓、糖尿病、心力衰竭、慢性腎病、腦血管疾病等多種疾病密切相關(guān)。人們發(fā)現(xiàn)，局部RAS在多種器官如胰腺、心臟、腎臟、脈管系統(tǒng)、脂肪組織及神經(jīng)組織均發(fā)揮作用。RAS還具有血液動力學效應，包括調(diào)節(jié)細胞生長、分化、增殖和凋亡，調(diào)節(jié)活性氧(reactiveoxygenspecies，ROS

2、)的產(chǎn)生，組織炎癥反應和纖維化及激素分泌等。近年來，人們發(fā)現(xiàn)RAS中還存在腎素、腎素前體及其受體，腎素合成Ang的過程可不依賴于RAS系統(tǒng)，而可能在腎臟中發(fā)生。不依賴于AngH的RAS產(chǎn)生的生物學效應，提示ARBs和ACEI的作用可能在高糖環(huán)境下有局限性。其中，腎素前體是由腎臟產(chǎn)生，其血漿濃度約比腎素高10倍。腎素前體與受體結(jié)合后，發(fā)生分子結(jié)構(gòu)的變化，使其具有酶活性。血糖升高造成體內(nèi)RAS活性明顯增強，繼而造成內(nèi)皮功能紊亂、炎癥反應發(fā)生

3、等。不協(xié)調(diào)的RA系統(tǒng)可能是造成糖尿病患者內(nèi)皮功能紊亂的調(diào)節(jié)機制之一，并可能導致糖尿病的大血管和微血管并發(fā)癥。伴有微血管并發(fā)癥的糖尿病個體，其血漿腎素前體水平升高，這可能是失去平衡的RA系統(tǒng)的部分表現(xiàn)。很多臨床研究顯示，局部或整體的腎素血管緊張素系統(tǒng)失調(diào)在糖尿病慢性并發(fā)癥中發(fā)揮重要作用，調(diào)節(jié)RAS是防治糖尿病并發(fā)癥的重要途徑。內(nèi)皮細胞在動脈硬化的發(fā)病機理和血管緊張性的控制發(fā)揮重要作用，而內(nèi)皮細胞的功能受損是發(fā)生高血脂、糖尿病、吸煙和高血壓

4、后最早的病理變化之一，而這些都是導致冠脈疾病發(fā)生的非常重要的危險因素。然而，高糖導致內(nèi)皮細胞損傷的確切機制尚未完全清楚。糖尿病合并大血管和微血管疾病，內(nèi)皮功能紊亂是其主要的始動因素。內(nèi)皮功能損傷和炎性反應被證實為導致心血管疾病發(fā)展的主要機制。當機體被致病因子刺激后，內(nèi)皮細胞觸發(fā)決定性的炎性成分，其中包括滲透性增高、白細胞增多，以及炎性細胞活性產(chǎn)物上調(diào)，都是血管功能的紊亂的發(fā)病機理。
　　 本課題前期工作已證實，高糖刺激下，人臍靜

5、脈內(nèi)皮細胞(HUVECs)腎素前體表達有所增加，并且具有濃度依賴性和時間依賴性。而高糖對臍靜脈內(nèi)皮細胞的腎素前體表達的作用機制有待進一步研究。
　　 目的:體外培養(yǎng)HUVECs，研究高糖刺激條件下，對腎素前體mRNA表達的影響，以及在阻斷AT1R和AT2R后，觀察腎素前體的變化，探究高糖對HUVECs的腎素前體影響的可能機制。
　　 方法:
　　 1.體外培養(yǎng)HUVECs細胞株。
　　 2.以不同濃度的葡

6、萄糖刺激HUVECs，觀察不同濃度的葡萄糖，HUVECs的腎素前體的mRNA表達變化。
　　 3.高濃度葡萄糖以不同刺激時間對HUVECs的腎素前體的mRNA表達的變化。
　　 4.用奧美沙坦和PD123319分別阻斷HUVECs的血管緊張素Ⅱ受體AT1和AT2，觀察腎素前體的變化及可能的機制。
　　 結(jié)果:
　　 1.不同濃度葡萄糖刺激HUVECs可使其腎素前體mRNA表達明顯改變，是具有濃度依賴性的。