家蠶卵色限性品種(W-1)蠶卵的發(fā)育后期及蟻蠶蛋白質(zhì)組的研究.pdf_第1頁
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文檔簡介

1、家蠶是完全變態(tài)昆蟲,一生中要經(jīng)過卵、幼蟲、蛹和成蟲4個形態(tài)完全不同的發(fā)育階段。對卵期胚胎發(fā)育不同時期的蛋白質(zhì)時間和空間的表達差異已經(jīng)有大量的研究,但對家蠶卵期和蟻蠶性別差異性表達的研究報道很少。
   本研究利用雙向電泳和質(zhì)譜相結(jié)合的蛋白質(zhì)組學(xué)的研究方法利用家蠶卵色限性品種(W-1)對催青后期胚胎和蟻蠶進行雌雄性別差異蛋白質(zhì)的研究,找出性別生理差異蛋白,結(jié)合家蠶數(shù)據(jù)庫進行質(zhì)譜鑒定,進一步發(fā)現(xiàn)性別會影響家蠶胚胎發(fā)育過程中器官和組織

2、蛋白質(zhì)的合成,獲得的主要結(jié)果如下:
   1.W-1蠶卵不同發(fā)育階段的形態(tài)圖
   用氫氧化鉀脫殼法成功解剖了家蠶品種W-1雌雄卵各個時期的胚胎,采用倒置顯微鏡拍攝了照片。為后續(xù)實驗材料做了充分的前期準(zhǔn)備。并且將雌雄胚胎分別解剖出來。
   2家蠶品種W-1己3期雌雄卵可溶性蛋白質(zhì)表達譜的研究
   2.1家蠶品種W-1己3期雌雄卵可溶性蛋白質(zhì)雙向電泳圖譜的建立
   用蛋白質(zhì)雙向電泳技術(shù)對己3期

3、家蠶卵可溶性蛋白進行了蛋白質(zhì)組分的比較分析。結(jié)果顯示:雄卵和雌卵分別檢測到317和335個斑點,能互相匹配的蛋白點273對。其中雄卵特異斑點44個,雌卵特異斑點62個。這些差異蛋白的出現(xiàn),顯示雌雄蠶卵可溶性蛋白質(zhì)組分存在差異。
   2.2家蠶品種W-1己3雌雄卵可溶性蛋白表達譜差異蛋白的質(zhì)譜鑒定
   特征蛋白進行了基質(zhì)輔助質(zhì)量飛行時間質(zhì)譜(MALDI-TOF MS)分析,已鑒定的蛋白包括家蠶未知的角蛋白、原肌球蛋白同

4、源體5、Sqd基因編碼的RNA結(jié)合蛋白、轉(zhuǎn)膠蛋白、熱激蛋白20.4、原肌球蛋白1和與果蠅同源的Tm1蛋白。進一步說明性別會影響胚胎器官和組織蛋白質(zhì)的合成。
   3家蠶品種W-1己4期雌雄卵蛋白質(zhì)雙向電泳圖譜比較分析
   用蛋白質(zhì)雙向電泳技術(shù)對己4期家蠶卵蛋白進行了蛋白質(zhì)組分的比較分析。結(jié)果顯示:雄性蠶卵蛋白樣品中共檢測到486個蛋白斑點,雌性蠶卵蛋白樣品中共檢測到427個蛋白斑點,雌雄能匹配的蛋白斑點有380對,匹配

5、率達到81.29%。其中雄性特異蛋白斑點106個,占總蛋白斑點數(shù)的21.81%。而雌性特異蛋白斑點47個,占總蛋白斑點數(shù)的11.01%。
   4家蠶品種W-1己5期雌雄卵蛋白質(zhì)雙向電泳圖譜比較分析
   對胚胎己5期雌雄卵蛋白質(zhì)用雙向電泳的技術(shù)和方法進行蛋白組分的比較分析。結(jié)果顯示:雄性蠶卵蛋白樣品中共檢測到471個蛋白斑點,雌性蠶卵蛋白樣品中共檢測到432個蛋白斑點,雌雄能匹配的蛋白斑點有395對,匹配率達到84.2

6、7%。其中雄性特異蛋白斑點76個,而雌性特異蛋白斑點37個。
   5家蠶卵色限性品種(W-1)雌雄蟻蠶蛋白質(zhì)表達譜的研究
   5.1家蠶品種W-1雌雄蟻蠶蛋白質(zhì)雙向電泳圖譜的建立
   應(yīng)用雙向電泳和圖像分析技術(shù),研究家蠶品種W-1雌雄蟻蠶的總蛋白的差異。結(jié)果顯示:雄蟻和雌蟻分別檢測到478和444個蛋白點,能相互匹配的蛋白點為410對,占88.57%,雄蟻特異斑點有68個,雌蟻有34個。這些差異蛋白的出現(xiàn),

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