脂肪乳治療大鼠布比卡因心臟毒性機制的探討.pdf

1、布比卡因(Bupivacaine)是一種長效酰胺類局麻藥,具有麻醉作用時間長,麻醉作用效果強的特點,在臨床上廣泛應用于硬膜外阻滯,蛛網(wǎng)膜下腔阻滯,臂叢神經(jīng)阻滯等,但是布比卡因也有一定的毒副作用,主要表現(xiàn)在中樞神經(jīng)系統(tǒng)毒性和心臟毒性,其中心臟毒性表現(xiàn)最明顯,布比卡因的心臟毒性主要表現(xiàn)為負性肌力和負性傳導,如PR間期和QRS間期延長,心動過緩、室性早搏,以及室性心動過速,嚴重的可以出現(xiàn)室顫甚至心臟驟停(Cardiac Arrest)。一旦出

2、現(xiàn)心臟驟停復蘇非常困難。有研究表明用脂肪乳可以治療因布比卡因引起的心臟驟停,但是相關機制仍不太清楚,目前對脂肪乳治療布比卡因引起的心臟驟停機制主要集中在脂質(zhì)池假說,線粒體能量代謝假說,離子通道假說等方面。本研究通過建立布比卡因心臟驟停脂肪乳復蘇的動物模型,通過測定心肌組織中布比卡因濃度,并測定心肌組織中線粒體能量代謝的關鍵酶的活性來揭示脂肪乳治療布比卡因心臟驟停的可能機制,為臨床研究提供相關理論依據(jù)。
　　 目的：通過建立布比卡

3、因引起的心臟驟停并用脂肪乳進行治療的動物模型,觀察脂肪乳治療布比卡因心臟驟停的效果,并結合相關實驗室檢查來探討其對布比卡因引起的心臟驟停治療的相關機制,為臨床研究提供相關理論依據(jù)。
　　 材料與方法：
　　 1.研究對象：24只健康成年SD大鼠(體重280～320g)雌雄不拘,由河南省實驗動物中心提供。
　　 2.實驗方法：24只SD大鼠隨機分為兩組,每組12只,A組為布比卡因致心臟驟停組,B組為布比卡因致心臟驟

4、停,脂肪乳復蘇組。20％的鹽酸氯胺酮100mg/kg腹腔注射麻醉后,將動物仰臥固定于動物實驗臺,手術部位常規(guī)消毒后行氣管切開,氣管插管,頸總動脈穿刺,機械通氣,股靜脈穿刺,之后分別給A組和B組大鼠于股靜脈注射10mg/kg0.5%鹽酸布比卡因致心臟驟停,A組大鼠于心臟驟停后靜脈注射15ml/kg生理鹽水和腎上腺素10μg/kg,每分鐘重復一次,總共3次,之后每5min注入腎上腺素10μg/kg。,并行人工心肺復蘇(CPR),B組大鼠于心

5、臟驟停后股靜脈注射15ml/kg20%脂肪乳和腎上腺素10μg/kg,每分鐘重復一次,總共3次,之后每5min注入腎上腺素10μg/kg,并進行人工心肺復蘇。實驗過程中連續(xù)監(jiān)測大鼠的ECGHR,BP等基本生命指證.心肌組織和血漿中鹽酸布比卡因的濃度的測定用高效液相色譜法,這種檢測方法是一種液～液萃取法,其中萃取液是由正己烷和叔甲醚組成的混合液,將甲醇和三乙胺鹽緩沖液組成的混合液的pH值調(diào)至3.0,該混合液為流動相。色譜柱為Dima C1

6、8色譜柱,柱溫30℃,檢測波長為215nm,流速1.0ml/mim色譜進樣量為25μl。2ml的50%甲醇作為溶劑與0.5mg心臟組織一起勻漿,取200μl勻漿液與100μl的4%NaOH溶液混合后在一起渦旋30秒,在渦旋好的混合液中加入3ml萃取液,之后再渦旋3min,將渦旋好的混合液于3000r/min離心10min,取有機相2ml于離心管中,將其放置于水浴箱中,將溫度調(diào)至35℃,在水域的條件下用氮氣把有機相吹干,把100μl流動相

7、加入錐形瓶中與所得的干燥殘留物混合渦旋30秒,然后放置離心機中將轉數(shù)設置成12000r/min,高速離心10min,用移液器精確量取75μl離心好的上層液,放入250μl管形瓶中,HPLC系統(tǒng)每次自動抽取25μl檢測。并用ELISA檢測法測定心肌組織中肉堿-脂酰肉堿轉移酶(CACT)的活性。
　　 結果：
　　 1.兩組動物基本生命BP,HR,WET等無明顯差異(P＞0.05)。
　　 2.與A組大鼠相比,B組大