脂肪乳逆轉(zhuǎn)布比卡因誘導(dǎo)大鼠離體胸主動(dòng)脈毒性的機(jī)制研究.pdf

1、布比卡因(bupivacaine，BUP)是一種長(zhǎng)效酰胺類局麻藥，具有麻醉作用時(shí)間長(zhǎng)，麻醉作用強(qiáng)的特點(diǎn)。脂肪乳(lipid emulsion，LE)可以治療BUP引起的毒性作用，但是其機(jī)制尚不十分清楚。本研究首先分析了不同給藥方式給予BUP對(duì)大鼠離體胸主動(dòng)脈的影響;此外，通過(guò)不同的收縮劑對(duì)大鼠胸主動(dòng)脈預(yù)收縮后，分析BUP誘發(fā)的血管舒張作用及其機(jī)制;探討B(tài)UP對(duì)α1受體激動(dòng)劑苯腎上腺素(phenylephrine，Phe)誘發(fā)血管收縮的時(shí)

2、間依賴性雙向調(diào)節(jié)作用以及LE對(duì)BLUP抑制α1受體激動(dòng)劑誘發(fā)血管收縮的逆轉(zhuǎn)作用。我們還分析了BUP對(duì)LE以及五羥色胺(5-hydroxytryptamine，5-HT)誘發(fā)血管收縮以及乙酰膽堿(acetylcholine，ACh)誘發(fā)血管舒張的調(diào)控作用，進(jìn)一步闡明BUP的血管毒性作用以及LE救治BUP誘發(fā)毒性作用的機(jī)制。本文主要從以下幾部分展開(kāi)論述:
　　第一部分 布比卡因?qū)Υ笫箅x體胸主動(dòng)脈張力的調(diào)節(jié)作用
　　目的:分析BU

3、P累積濃度給藥和單濃度給藥誘發(fā)大鼠胸主動(dòng)脈收縮反應(yīng)的特征。通過(guò)Phe以及KCl對(duì)血管預(yù)收縮后，分析BUP誘發(fā)大鼠胸主動(dòng)脈的舒張作用及其機(jī)制。
　　方法:制備大鼠離體胸主動(dòng)脈血管環(huán)，記錄藥物誘發(fā)的血管收縮反應(yīng)以及舒張反應(yīng)。
　　結(jié)果:
　　1.BUP單濃度給藥或累積濃度給藥時(shí)大鼠離體胸主動(dòng)脈的收縮反應(yīng)。
　　2.BUP三次累積濃度給藥時(shí)大鼠離體胸主動(dòng)脈的收縮反應(yīng)。
　　第二部分 布比卡因?qū)Ζ?受體激動(dòng)劑誘導(dǎo)血

4、管收縮的雙向調(diào)節(jié)以及脂肪乳的逆轉(zhuǎn)作用
　　目的:研究BUP對(duì)大鼠離體胸主動(dòng)脈α1受體介導(dǎo)血管收縮的時(shí)間依賴性調(diào)節(jié)作用。如果BUP抑制α1受體介導(dǎo)血管收縮，我們進(jìn)一步考察LE是否能夠逆轉(zhuǎn)BUP的血管抑制作用。此外，我們還研究了BUP對(duì)5-HT介導(dǎo)血管收縮反應(yīng)的調(diào)節(jié)作用。
　　方法:制備大鼠離體胸主動(dòng)脈血管環(huán)，記錄藥物誘發(fā)的血管收縮反應(yīng)以及舒張反應(yīng)。
　　結(jié)果:
　　1.BUP預(yù)處理20 min對(duì)Phe誘發(fā)血管收縮及

5、ACh誘發(fā)血管舒張反應(yīng)的影響。
　　2.BUP預(yù)處理40 min對(duì)Phe誘發(fā)血管收縮及ACh誘發(fā)血管舒張反應(yīng)的影響。
　　3.LE對(duì)BUP誘發(fā)血管毒性的逆轉(zhuǎn)作用
　　在NS+BUP組、LE組和LE+BUP組血管標(biāo)本，Phe(0.0001～30μmol/L)產(chǎn)生的首輪濃度-收縮反應(yīng)曲線，與NS組相比未見(jiàn)統(tǒng)計(jì)學(xué)差異(P＞0.05)。四組標(biāo)本第二次暴露于Phe時(shí)，與NS組相比，LE組的收縮反應(yīng)顯著增強(qiáng)，30μmol/L濃度P

6、he誘發(fā)的收縮反應(yīng)增強(qiáng)了23％(P＜0.01)。與NS組相比，NS+BUP組的收縮反應(yīng)顯著降低，30μmol/L濃度Phe誘發(fā)的收縮反應(yīng)降低了21％(P＜0.01);LE預(yù)處理?xiàng)l件下（LE+BUP組）可使30μmol/LPhe誘發(fā)的血管收縮反應(yīng)恢復(fù)至NS組水平(P＞0.05)。LE增強(qiáng)Phe收縮血管的效應(yīng)可因標(biāo)本反復(fù)沖洗而消失。
　　NS組和NS+BUP組標(biāo)本上，ACh（0.0001～3μmol/L）產(chǎn)生的首輪濃度-舒張反應(yīng)曲線相

7、同(P＞0.05);在LE組和LE+BUP組血管標(biāo)本，ACh產(chǎn)生的首輪濃度-舒張反應(yīng)曲線顯著弱于NS組(P＜0.01)，但是兩組的抑制程度相同。四組標(biāo)本第二次暴露于ACh時(shí)，與NS組相比，LE組和NS+BUP組ACh誘導(dǎo)的舒張反應(yīng)顯著降低(P＜0.01)，且后者的抑制程度顯著強(qiáng)于前者(P＜0.05)。與NS+BUP組相比，LE+BUP組標(biāo)本上ACh誘導(dǎo)的舒張反應(yīng)進(jìn)一步顯著降低(P＜0.01)。
　　4.不同濃度LE對(duì)Phe誘發(fā)血管

8、收縮及ACh誘發(fā)血管舒張反應(yīng)的影響
　　與NS組相比，當(dāng)標(biāo)本暴露LE(0.2％～0.6％)5 min后，Phe誘導(dǎo)的濃度-收縮反應(yīng)曲線無(wú)顯著變化(P＞0.05)。0.8％濃度的LE可使Phe的-LogEC50值由NS組的（7.32±0.17）顯著升高至(7.74±0.24)(P＜0.01)，但是Phe的Emax無(wú)顯著變化(P＞0.05)。五組標(biāo)本第二次暴露于Phe時(shí)，與NS組相比，0.2％～0.8％濃度的LE不僅使Phe誘導(dǎo)血管收

9、縮的Emxx顯著增強(qiáng)(P＜0.01)，亦使其-LogEC50值顯著增大(P＜0.01)。與0.2％濃度的LE相比，0.6％和0.8％濃度的LE尚可使Phe的-LogEC50值進(jìn)一步顯著增大(P＜0.05，P＜0.01)。
　　與NS組相比，當(dāng)標(biāo)本暴露于LE(0.2％～0.8％)5 min后，ACh(0.0001～3μmol/L)誘導(dǎo)的舒張反應(yīng)均顯著降低(P＜0.01)，其中0.8％濃度LE降低ACh誘發(fā)舒張反應(yīng)的程度顯著強(qiáng)于0.2

10、％的LE(P＜0.01)。在LE持續(xù)存在下，5組標(biāo)本第二次暴露于ACh時(shí)，0.2％、0.4％和0.6％濃度的LE抑制ACh（3μmol/L）誘發(fā)舒張反應(yīng)的作用由暴露于LE5min時(shí)的70.57±6.22％、62.70±6.82％和67.38±7.27％分別進(jìn)一步減弱至51.99±6.10％、44.57±6.30％和45.47±4.70％。
　　5.育亨賓及普萘洛爾對(duì)Phe誘發(fā)血管收縮反應(yīng)的影響
　　給予育亨賓（0.3μmol

11、/L）以及普萘洛爾（1μmol/L）前，兩組間Phe誘導(dǎo)的濃度-收縮反應(yīng)曲線無(wú)顯著差異(P＞0.05);應(yīng)用育亨賓和普萘洛爾阻斷α2受體和β受體后，兩組間Phe誘導(dǎo)的濃度-收縮反應(yīng)曲線亦無(wú)顯著差異(P＞0.05)。
　　6.BUP預(yù)處理40 min對(duì)5-HT誘發(fā)血管收縮反應(yīng)的影響
　　BUP（10μmol/L）組和溶媒對(duì)照組標(biāo)本Phe(0.0001～30μmol/L)誘發(fā)的收縮反應(yīng)相比，未見(jiàn)顯著性差異(P＞0.05)。BUP

12、（10μmol/L）組給予BLUP前，5-HT（0.1～300μmol/L）誘發(fā)的收縮反應(yīng)與溶媒對(duì)照組相比均無(wú)顯著性差異(P＞0.05)。給予10μmol/L濃度BUP孵育40 min后，5-HT誘導(dǎo)的血管收縮反應(yīng)與溶媒對(duì)照組相比同樣無(wú)顯著性差異(P＞0.05)。
　　第三部分 脂肪乳劑對(duì)大鼠離體胸主動(dòng)脈收縮的調(diào)節(jié)作用
　　目的:對(duì)比LE長(zhǎng)時(shí)間孵育后對(duì)α1受體激動(dòng)劑Phe以及5-HT誘導(dǎo)內(nèi)皮完整以及去內(nèi)皮大鼠胸主動(dòng)脈收縮反應(yīng)

13、的增強(qiáng)作用。
　　方法:制備大鼠離體胸主動(dòng)脈血管環(huán)，記錄藥物誘發(fā)的血管收縮反應(yīng)。
　　結(jié)果:在LE給予之前，建立第一輪Phe(0.0001～30μmol/L)誘發(fā)血管收縮的累積濃度-反應(yīng)曲線。Endothelium-intact+NS組和Endothelium-intact+LE組相比無(wú)顯著性差異（P＞0.05），Endothelium-denuded+NS組和Endothelium-denuded+LE組相比同樣無(wú)顯著性差

14、異（P＞0.05）。比較Endothelium-intact+NS組和Endothelium-denuded+NS組以及 Endothelium-intact+LE和Endothelium-denuded+LE組，去除內(nèi)皮組Phe誘發(fā)的血管收縮反應(yīng)明顯高于內(nèi)皮完整組，同時(shí)，Phe誘發(fā)血管收縮曲線的Emax和-LogEC50同樣明顯增大（P＜0.01）。
　　0.4％濃度的LE長(zhǎng)時(shí)間孵育后，建立第二輪Phe（0.0001～30μmo

15、l/L）誘發(fā)血管收縮的累積濃度-反應(yīng)曲線。研究發(fā)現(xiàn)，Endothelium-intact+LE組Phe誘導(dǎo)的血管收縮反應(yīng)顯著大于Endothelium-intact+NS組(P＜0.05)，其Emax值分別為2.72±0.35和2.23±0.23 g，0.4％ LE預(yù)處理后，Emax值增加了22％。兩組之間-LogEC50分別為6.93±0.30和6.58±0.21 mol/L，具有顯著性差異(P＜0.01)。與Endothelium-

16、denuded+NS組相比，Endothelium-denuded+LE組Phe誘導(dǎo)的血管收縮反應(yīng)顯著增大(P＜0.05)，其Emax值分別為2.53±0.21和2.82±0.22 g，0.4％ LE預(yù)處理后，Emax值增加了11％。兩組之間-LogEC50分別為7.37±0.22和7.07±0.21 mol/L，具有顯著性差異(P＜0.01)。
　　結(jié)論:
　　累積給藥時(shí)，高劑量BUP誘發(fā)大鼠離體胸主動(dòng)脈舒張反應(yīng)顯著強(qiáng)于單

17、劑量給藥方式。反復(fù)累積給藥后，BLUP誘發(fā)的血管收縮反應(yīng)明顯下降，損傷高鉀誘發(fā)的血管收縮。
　　離體大鼠胸主動(dòng)脈預(yù)收縮狀態(tài)下，BUP對(duì)不同收縮劑預(yù)收縮血管產(chǎn)生不同的舒張作用。對(duì)于去內(nèi)皮血管，BUP引起的血管最大舒張率為:KCl＞Phe。BUP的血管舒張作用主要是通過(guò)血管平滑肌介導(dǎo)。
　　離體大鼠胸主動(dòng)脈暴露于臨床濃度的BLUP后，α1受體介導(dǎo)的收縮反應(yīng)呈現(xiàn)早期增強(qiáng)和長(zhǎng)期抑制兩種效應(yīng)。臨床濃度的BUP長(zhǎng)時(shí)間接觸標(biāo)本后顯著抑制P