脂肪乳逆轉(zhuǎn)布比卡因心臟毒性的作用研究.pdf

1、布比卡因是臨床上常用的脂溶性酰胺類長效局麻藥,在臨床上廣泛用于外周神經(jīng)阻滯、硬脊膜外阻滯和蛛網(wǎng)膜下腔阻滯,如果誤入靜脈或劑量過大,則可導(dǎo)致嚴(yán)重的心血管毒性反應(yīng)。由于缺乏特異性的拮抗藥物,臨床處理以對(duì)癥治療為主要方法,近幾年來,無論從動(dòng)物實(shí)驗(yàn)還是臨床個(gè)案報(bào)道都顯示脂肪乳在救治局麻藥心臟毒性時(shí)效果確切,尤其是對(duì)脂溶性藥物布比卡因的解毒效果甚為明顯。腎上腺素作為心肺復(fù)蘇時(shí)的一線用藥,也被認(rèn)為是在救治布比卡因心臟毒性時(shí)的有效藥物。然而,在救治布

2、比卡因心臟毒性時(shí)腎上腺素的效果是否優(yōu)于脂肪乳還需實(shí)驗(yàn)進(jìn)行說明。基于此我們首先設(shè)計(jì)實(shí)驗(yàn)觀察脂肪乳在逆轉(zhuǎn)布比卡因心臟毒性時(shí)其效果是否優(yōu)于脂肪乳聯(lián)合腎上腺素的作用。由于目前對(duì)脂肪乳救治布比卡因心臟毒性機(jī)制不清,為其能安全廣泛地應(yīng)用于臨床上,我們有必要研究清楚其作用機(jī)制。實(shí)驗(yàn)二擬以H9C2心肌細(xì)胞為研究對(duì)象,觀察脂肪乳對(duì)布比卡因作用的H9C2心肌細(xì)胞凋亡的影響,從脂肪乳抑制心肌細(xì)胞凋亡角度初探其逆轉(zhuǎn)布比卡因心臟毒性的作用機(jī)制。
　　實(shí)驗(yàn)一

3、:評(píng)價(jià)脂肪乳在逆轉(zhuǎn)布比卡因心臟毒性時(shí)的療效
　　目的:觀察脂肪乳(lipid emulsion,LE)以及LE聯(lián)合腎上腺素(Epinephrine,EPI)在救治布比卡因(Bupivacaine,BPV)所致家犬心臟毒性時(shí)的療效。
　　方法:健康成年家犬21只,分為3組,每組7只:生理鹽水(Saline)組(A組),20％LE組(B組),20%LE+EPI(C組)。0.75%布比卡因10mg·Kg-1經(jīng)股靜脈勻速推注,待MA

4、P降至基礎(chǔ)值的50%及ECG出現(xiàn)寬大畸形QRS波時(shí)行心肺復(fù)蘇(CPR),同時(shí)分別給予A組生理鹽水4ml/kg,B組20%LE4ml/kg,C組20%LE4ml/kg+EPI10μg/kg。持續(xù)監(jiān)測血壓及心率,記錄不同時(shí)間點(diǎn)自主循環(huán)恢復(fù)(ROSC)的家犬?dāng)?shù)量及MAP、HR、心電圖PR間期、QRS間期及QT間期的變化。
　　結(jié)果:在救治第10min時(shí),B組ROSC數(shù)量略多于A組和C組,但差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義,在第15和第20min時(shí)明顯多

5、于A組和C組(P<0.05)。B組家犬在第20min時(shí)MAP明顯高于A組和C組(P<0.05或P<0.01),HR明顯快于A組和C組(P<0.05或P<0.01),PR間期、QRS間期、QT間期明顯短于A組和C組(P<0.05或P<0.01)。
　　結(jié)論:成功建立布比卡因心臟毒性的模型,20%脂肪乳救治能明顯提高家犬的生存率,且救治后的血流動(dòng)力學(xué)指標(biāo)明顯優(yōu)于20%脂肪乳聯(lián)合腎上腺素10μg·Kg-1的效果。
　　實(shí)驗(yàn)二:脂肪

6、乳對(duì)布比卡因致H9C2心肌細(xì)胞凋亡的影響
　　目的:觀察脂肪乳(Lipidemulsion,LE)對(duì)布比卡因(Bupivacaine,BPV)誘導(dǎo)的H9C2心肌細(xì)胞凋亡的影響。
　　方法:分組一:對(duì)照組、脂肪乳劑組(LE濃度分別為0.25%、0.5%、1%和2%)及布比卡因組(BPV濃度為0.38、0.54、0.77和1.54mM)培養(yǎng)24h后觀察H9C2的存活率(MTT法),得到LE誘導(dǎo)的心肌細(xì)胞最佳增殖濃度以及BPV誘導(dǎo)

7、心肌細(xì)胞凋亡的半數(shù)抑制濃度。分組二:對(duì)照組、LE(1%)組、1.54mMBPV及LE(1%)聯(lián)合BPV濃度為1.54mM在不同時(shí)間點(diǎn)(6h、12h及24h)細(xì)胞的存活率,并通過Hoechst33258染色后在熒光顯微鏡下觀察其凋亡情況,最后用流式細(xì)胞儀檢測細(xì)胞的凋亡程度。
　　結(jié)果:布比卡因不同濃度對(duì)大鼠H9C2心肌細(xì)胞均顯示出不同程度的細(xì)胞毒性作用,作用24h后1.54mM的BPV能使大多數(shù)細(xì)胞凋亡或死亡,而脂肪乳對(duì)H9C2心肌