雙黃連口服液中連翹酯苷A吸收與代謝研究.pdf

1、口服給藥是臨床最常用的給藥方式。中藥活性成分的體內(nèi)過程特征、機制及影響因素研究是給藥途徑、劑型設(shè)計及工藝優(yōu)化研究的重要內(nèi)容,其中活性成分的體內(nèi)吸收、代謝是影響中藥制劑生物利用度的關(guān)鍵環(huán)節(jié),研究揭示中藥活性組分的吸收、代謝機理,了解影響吸收、代謝的因素,明確吸收過程中轉(zhuǎn)運體及代謝過程中酶的作用、作用機制與作用程度,以及中藥多種活性組分在吸收、代謝過程中的相互作用,有利于揭示中藥制劑特點及組方合理性。
　　 本課題以雙黃連口服液為研

2、究對象,通過生物藥劑學(xué)和藥動學(xué)手段研究主要活性成分的吸收、代謝過程,以及吸收、代謝過程中組分間的相互作用,為該制劑的劑型選擇、處方篩選、工藝優(yōu)化、質(zhì)量評價和臨床合理應(yīng)用提供依據(jù),從吸收、代謝角度揭示組方的科學(xué)性。
　　 雙黃連口服液具有廣譜抗菌,抗病毒及增強機體免疫功能及解熱消炎等作用,本文以其中藥理活性顯著的成分.連翹酯苷A為研究對象,建立適用于雙黃連中連翹酯苷A吸收、代謝研究的大鼠原位灌注模型、整體動物實驗?zāi)Ｐ鸵约绑w外肝微粒

3、體模型,系統(tǒng)地研究了雙黃連中主要活性成分連翹酯苷A的吸收、代謝機制及其影響因素。從吸收、代謝角度闡明雙黃連口服液中主要活性成分連翹酯苷A生物利用度高于連翹提取液中連翹酯苷A生物利用度的原因。
　　 體內(nèi)藥動學(xué)模型表明,大鼠灌胃給藥不同的組方配伍,LC-MS測定血漿中連翹酯苷A的濃度,經(jīng)DAS1.0程序處理數(shù)據(jù),考察不同藥材配伍對連翹酯苷A體內(nèi)生物利用度的影響。結(jié)果表明,連翹酯苷A的AUC、Cmax等大小順序為連翹提取液＜連翹+金

4、銀花提取液、連翹+黃芩提取液＜雙黃連。說明雙黃連口服液中組方配伍改變了連翹酯苷A的ADME,提高了雙黃連口服液中連翹酯苷A的生物利用度。
　　 大鼠原位胃灌注模型表明,連翹酯苷A在胃內(nèi)單位時間百分吸收轉(zhuǎn)化率較差,小于10％,無自身濃度抑制作用,連翹酯苷A可能以被動擴散方式進入體循環(huán)。雙黃連中組方配伍對連翹酯苷A胃吸收無顯著性影響,均小于10％。
　　 大鼠原位腸灌注模型表明,不同濃度的連翹酯苷A在大鼠腸道吸收無顯著性差異

5、(P＞0.05);其在十二指腸、空腸、回腸、結(jié)腸段的吸收未發(fā)生明顯變化。由此推測在實驗濃度范圍內(nèi),連翹酯苷A在大鼠腸道內(nèi)的吸收方式可能為被動擴散,且無特定的吸收部位。在大鼠腸循環(huán)液中加入4μg·Ml-1環(huán)孢素、50μmol·L-1咪達唑侖后,循環(huán)液中連翹酯苷A的剩余藥量分別為466.16μg和463.43μg,與對照組相比均有不同程度的增加,呈顯著性差異(P＜0.05),且隨著環(huán)孢素、咪達唑侖濃度的增加,循環(huán)液中的剩余藥量呈增加趨勢;加

6、入50μmol·L-1地高辛、10μg·mL-1EDTA后,循環(huán)液中連翹酯苷A的剩余藥量分別為325.11μg和369.89μg,與對照組相比均有不同程度的降低,呈顯著性差異(P＜0.05),且隨著地高辛、EDTA濃度的增加,循環(huán)液中的剩余藥量呈降低趨勢;而不同濃度的甘露醇對循環(huán)液中連翹酯苷A的剩余藥量幾乎無影響。由此推斷,連翹酯苷A在大鼠腸道的吸收以被動擴散為主,同時存在細胞旁路轉(zhuǎn)運,且P-gp及CYP3A4酶的底物對連翹酯苷A的吸收

7、呈劑量依賴性的影響。連翹酯苷A單位時間百分吸收轉(zhuǎn)化率分別為雙黃連＜連翹+黃芩提取液、連翹+金銀花提取液＜連翹提取液,且連翹提取液中連翹酯苷A吸收與其他配伍相比有顯著性差異(P＜0.05)。不同濃度黃芩苷、黃芩素、綠原酸對連翹酯苷A腸吸收影響表明黃芩苷、黃芩素、綠原酸配伍大大降低連翹酯苷A表觀吸收,且具顯著性差異(P＜0.05)。
　　 體外肝微粒體模型表明,連翹酯苷A可能為CYP3A4、CYP2C9、CYP1A2、UGT1A6、

8、UGT1A3、UGT1A1和UGT1A9的共同底物;綠原酸可能為CYP3A4、CYP2C9、CYP1A2、CYP2C19、UGT1A6、UGT1A3和UGT1A1的共同底物;黃芩苷可能為CYP3A4、CYP2C19、CYP1A2、UGT1A9、UGT1A1和UGT1A3的共同底物;黃芩素可能為CYP3A4、CYP2E1和UGT1A6的共同底物。在體外肝微粒體代謝實驗中,其剩余藥量為雙黃連＞黃芩+連翹、金銀花+連翹＞連翹。因此雙黃連口服液

9、中綠原酸作用于CYP3A4、CYP2C9、CYP1A2、UGT1A6、UGT1A3和UGT1A1、黃芩苷作用于CYP3A4、CYP1A2、UGT1A9、UGT1A1和UGT1A3、黃芩素作用于CYP3A4和UGT1A6對連翹酯苷A代謝起抑制作用,從而使雙黃連口服液中連翹酯苷A生物利用度大于連翹提取液中連翹酯苷A生物利用度。
　　 本文以多角度、多生物模型研究雙黃連口服液中主要活性成分連翹酯苷A的吸收與代謝機理及其影響因素,以及吸