體內(nèi)外誘導(dǎo)對(duì)阿薩希毛孢子菌形態(tài)及藥敏影響的研究.pdf

1、目的：
　　1、觀察T.asahii在體內(nèi)外誘導(dǎo)前后其形態(tài)變化以及對(duì)氟康唑藥物敏感性的變化；
　　2、觀察T.asahii感染模型接受氟康唑干預(yù)前后分離株對(duì)氟康唑敏感性的變化，并比較與體內(nèi)自然傳代后分離菌株對(duì)氟康唑MIC值之間的差異。
　　方法：
　　1、選擇不同來源的2株T.asahii（臨床分離株CBS2479和環(huán)境分離株CBS8904），在含有氟康唑濃度梯級(jí)倍增的PDA培養(yǎng)基中分別連續(xù)傳代培養(yǎng)，直至其最低抑

2、菌濃度(MIC)＞256 ug/ml，觀察藥物誘導(dǎo)前后各菌株氟康唑MIC值的差異及菌落形態(tài)和細(xì)胞形態(tài)的改變；
　　2、以3株環(huán)境來源的T.asahii和1株臨床來源的T.asahii為研究對(duì)象，在小鼠體內(nèi)反復(fù)5次傳代后，參照M27-A3方案，測(cè)定傳代前后菌株的氟康唑MIC值，并分別通過肉眼和顯微鏡下觀察傳代前后菌株菌落形態(tài)和細(xì)胞形態(tài)的變化；
　　3、4株T.asahii感染模型小鼠分別接受氟康唑間斷干預(yù)及持續(xù)干預(yù)，測(cè)定50天

3、后分離株的氟康唑MIC值。
　　結(jié)果：
　　1、T.asahii臨床株CBS2479、環(huán)境株CBS8904經(jīng)過氟康唑體外誘導(dǎo)18d、9代后，二者的MIC值由親代的1.0ug/ml和2.0ug/ml均升高到＞256ug/ml，誘導(dǎo)后菌株MIC值分別較誘導(dǎo)前提高了256倍和128倍。體外誘導(dǎo)后，臨床株菌落表面溝回、皺褶減少且變小，菌落邊緣皺褶消失，呈光滑狀，細(xì)胞形態(tài)較前出現(xiàn)更多孢子；環(huán)境株菌落中央溝回消失，出現(xiàn)較多沙粒狀凸起，細(xì)

4、胞形態(tài)無明顯變化；
　　2、T.asahii CBS2479/CBS8904/CBS8520/CBS7137分別在小鼠體內(nèi)自然傳代經(jīng)過50d、5代后獲得的分離株氟康唑MIC值由親代的1.0/2.0/1.0/0.5ug/ml分別增長(zhǎng)至16.0/4.0/4.0/4.0ug/ml，升高了2-16倍，其中臨床株CBS2479增長(zhǎng)最高，達(dá)16ug/ml。臨床株體內(nèi)傳代后菌落中央溝回減少，邊緣皺褶增大，細(xì)胞形態(tài)無明顯變化，均以菌絲為主；環(huán)境株

5、較體內(nèi)傳代前菌落表面形成更多皺褶和溝回，細(xì)胞結(jié)構(gòu)更容易形成菌絲；
　　3、藥物間斷干預(yù)的傳代菌株，經(jīng)過50d、5次體內(nèi)了連續(xù)傳代后， T.asahii CBS2479/CBS8904/CBS8520/CBS7137的MIC值由親代的1.0/2.0/1.0/0.5ug/ml分別增長(zhǎng)至32.0/16.0/16.0/16.0ug/ml，增長(zhǎng)了8-32倍，較體內(nèi)自然傳代明顯增高；體內(nèi)持續(xù)接受氟康唑干預(yù)獲得的以上4株 T.asahii的 M

6、IC值分別達(dá)到64.0/16.0/32.0/32.0ug/ml，比親代MIC增長(zhǎng)了16-64倍。與藥物間斷干預(yù)相比，連續(xù)干預(yù)組氟康唑MIC值增長(zhǎng)更高。
　　結(jié)論：
　　T.asahii體內(nèi)傳代及體外誘導(dǎo)前后形態(tài)及藥物敏感性均發(fā)生變化。體內(nèi)傳代后環(huán)境株形態(tài)有向臨床株轉(zhuǎn)變的趨勢(shì)，而體外誘導(dǎo)后臨床株逐漸向環(huán)境株轉(zhuǎn)變。體內(nèi)外誘導(dǎo)后氟康唑MIC值增高均以臨床株更為顯著，體內(nèi)自然傳代、體內(nèi)氟康唑干預(yù)和體外氟康唑誘導(dǎo)后，臨床株的氟康唑MI