海帶多糖對(duì)慢性腎功能衰竭及并發(fā)性血管鈣化的干預(yù)作用.pdf

1、海帶多糖是存在于海帶細(xì)胞中的一類天然生物大分子物質(zhì)，表現(xiàn)出多種生物活性。本文主要開(kāi)展了海帶多糖(LJP61A)對(duì)腺嘌呤誘發(fā)的小鼠慢性腎功能衰竭及并發(fā)性血管鈣化的干預(yù)效果研究，并通過(guò)離體鈣化模型對(duì)體內(nèi)實(shí)驗(yàn)進(jìn)行驗(yàn)證并探索LJP61A對(duì)血管平滑肌細(xì)胞鈣化形成的干預(yù)機(jī)制，現(xiàn)取得的研究結(jié)果如下：
　　(1)海帶多糖LJP61A對(duì)小鼠慢性腎功能衰竭的干預(yù)作用研究:采用腺嘌呤誘導(dǎo)的小鼠慢性腎功能衰竭實(shí)驗(yàn)?zāi)Ｐ停ㄟ^(guò)檢測(cè)小鼠體重、腎臟病理?yè)p傷及血清

2、和尿液各項(xiàng)生化指標(biāo)，探究LJP61A對(duì)腎功能衰竭是否存在干預(yù)作用。組織病理學(xué)研究顯示，LJP61A對(duì)腎臟代償性纖維化增生和腎小管損傷有一定的保護(hù)作用，呈量效關(guān)系。血清和尿液生化檢測(cè)結(jié)果顯示LJP61A可顯著降低慢性腎功能衰竭小鼠血清BUN、Crea水平，改善Ca2+、Mg2+、P3+等電解質(zhì)及蛋白質(zhì)代謝紊亂狀態(tài)，穩(wěn)定腎功能，表明LJP61A能顯著延緩腺嘌呤誘導(dǎo)的慢性腎功能衰竭病情的發(fā)展進(jìn)程。
　　(2)海帶多糖LJP61A對(duì)慢性腎

3、功能衰竭小鼠并發(fā)性血管鈣化的干預(yù)作用研究:通過(guò)復(fù)制慢性腎功能衰竭鈣磷代謝紊亂引起的血管鈣化的同時(shí)給予LJP61A干預(yù)，病理檢測(cè)結(jié)果顯示LJP61A能明顯降低主動(dòng)脈鈣和磷含量、ALP活性水平以及血清中PTH和FGF-23的含量;形態(tài)學(xué)研究和免疫組織化學(xué)分析結(jié)果顯示，海帶多糖能夠降低血管鈣化形成過(guò)程中的主動(dòng)脈鈣磷鹽沉積現(xiàn)象，并上調(diào)平滑肌細(xì)胞上鈣敏感受體的表達(dá);qRT-PCR和Western blotting結(jié)果顯示，LJP61A能顯著上調(diào)主

4、動(dòng)脈組織中血管平滑肌細(xì)胞標(biāo)志因子α-SMA、SM22α的基因表達(dá)以及降低Pit-1的基因表達(dá)，促進(jìn)鈣化抑制因子MGP和OPG的蛋白表達(dá)，并且顯著降低骨分化相關(guān)蛋白Cbfa-1、OC、RANKL、BMP-2的表達(dá)。結(jié)果表明海帶多糖LJP61A對(duì)腺嘌呤誘發(fā)的慢性腎功能衰竭并發(fā)性血管鈣化的發(fā)生有較強(qiáng)的干預(yù)作用。
　　(3)海帶多糖LJP61A對(duì)β-GP誘導(dǎo)的小鼠血管平滑肌細(xì)胞鈣化的干預(yù)作用初探:采用β-GP誘導(dǎo)MOVAS細(xì)胞鈣化模型，當(dāng)

5、LJP61A在濃度為25μg/mL時(shí)，明顯減少細(xì)胞內(nèi)的鈣化結(jié)節(jié)及ALP的分泌。qRT-PCR結(jié)果顯示，LJP61A能夠上調(diào)β-GP誘導(dǎo)的MOVAS細(xì)胞中MGP、OPN、α-SMA、SM22α的轉(zhuǎn)錄表達(dá)水平以及降低Pit-1的基因表達(dá)。Western blotting結(jié)果顯示，LJP61A能夠抑制內(nèi)源性鈣化促進(jìn)因子Cbfa-1、OC、BMP-2和RANKL蛋白表達(dá)，并且顯著上調(diào)鈣化抑制因子OPG和MGP蛋白表達(dá)。綜上結(jié)果表明，LJP61A