活性氧介導(dǎo)PGF2α誘導(dǎo)的心肌細(xì)胞肥大.pdf

1、目的: 觀察前列腺素F2α（Prostaglandin F2α,PGF2α）對(duì)心肌細(xì)胞內(nèi)活性氧（reactive oxygen species，ROS）的產(chǎn)生及其促心肌細(xì)胞肥大的作用，以探討ROS在PGF2α誘導(dǎo)的心肌細(xì)胞肥大的信號(hào)通路中的作用。 方法: 利用培養(yǎng)的新生大鼠心室肌細(xì)胞，以細(xì)胞的直徑大小、細(xì)胞內(nèi)蛋白含量為心肌細(xì)胞肥大的反應(yīng)指標(biāo)；用ROS敏感的熒光探針（DCFH-DA）反映細(xì)胞內(nèi)ROS水平。將培養(yǎng)細(xì)胞隨機(jī)分為六組：空

2、白對(duì)照組、1nmol/lPGF2α組、10nmol/lPGF2α組、100nmol/lPGF2α組、100nmol/l PGF2α+CAT組、100nmol/l PGF2α+Egb組。用考馬斯亮藍(lán)法測(cè)定細(xì)胞內(nèi)總蛋白含量，用BI2000醫(yī)學(xué)圖像分析系統(tǒng)測(cè)細(xì)胞直徑，用熒光倒置顯微鏡檢測(cè)細(xì)胞內(nèi)熒光信號(hào)。 結(jié)果: 用1nmol/lPGF2α、10nmol/lPGF2α、100nmol/lPGF2α誘導(dǎo)心肌細(xì)胞，其細(xì)胞內(nèi)DCF-DA熒光強(qiáng)

3、度值分別比對(duì)照組增加38.99％、61.76％、93.55％（F=195.686，P<0.01），表明PGF2α呈劑量依賴性地誘導(dǎo)培養(yǎng)大鼠心肌細(xì)胞內(nèi)ROS的產(chǎn)生；其蛋白含量分別比對(duì)照組增加39.51％、69.93％、139.06％（F=74.014，P<0.01），其細(xì)胞直徑分別比對(duì)照組增加29.02％、60.79％、127.40％（F=721.020，P<0.01），表明PGF2α可劑量依賴地誘導(dǎo)培養(yǎng)大鼠心肌細(xì)胞的肥大。過(guò)氧化氫酶CA

4、T（200U/ ml）能使100nmol/l PGF2α誘導(dǎo)的心肌細(xì)胞內(nèi)DCF-DA熒光強(qiáng)度值比100nmol/l PGF2α組減少35.41％（P<0.01），蛋白含量減少42.42％，直徑減少47.70％；Egb（40μg/ml）能使100nmol/l PGF2α誘導(dǎo)的心肌細(xì)胞內(nèi)DCF-DA熒光強(qiáng)度值比100nmol/l PGF2α組減少26.56％（P<0.01），蛋白含量減少19.37％，直徑減少32.95％；表明抗氧化劑CAT