板栗殼的化學成分研究.pdf

1、板栗殼為板栗（Castanea mollissima Blume）的總苞，性甘、平，味澀，無毒，具有補腎強筋、健脾益氣、散結(jié)解毒之功效，可以治療腫毒、丹毒、瘰疬等疾病。板栗(Castanea mollissima Blume)屬殼斗科(Fagacaea)栗屬(Castanea)植物。板栗的入藥部位有樹根、樹皮、葉、花、外果皮、內(nèi)果皮、總苞等。本課題旨在對板栗殼的化學成分進行研究，為板栗殼進一步的開發(fā)利用提供一定的基礎。
　　本課題

2、主要分為三部分，第一部分為板栗殼中化學成分的提取，第二部分對分離得到的部分化合物進行活性篩選，第三部分為板栗殼的特征圖譜的建立。
　　采用95％乙醇對板栗殼的干燥粉末進行滲漉提取，得到提取物總浸膏。加適量水將浸膏制成懸浮液，再依次以石油醚、乙酸乙酯、正丁醇萃取，得到不同極性部位。本研究主要對乙酸乙酯部位進行研究，通過硅膠柱層析、RP-C18反相柱層析、SephadexLH-20凝膠柱層析、重結(jié)晶等分離純化手段，得到7個單體化合物。

3、通過與對照品進行對照，確定了3個化合物，即:β-谷甾醇(β-Sitosterol)(2)、齊墩果酸(Olean acid)(3)、山奈酚(kaempferol)(6)，其他化合物由1H-NMR、13C-NMR、EI-MS等波譜分析數(shù)據(jù)確定化學結(jié)構(gòu)。最終確定為:甲苯2，6-二氨基甲酸甲酯(Toluene2，6-2 methylcarbamate)(1)、芹黃素(Apigenin)(4)、樺木酸(Betulinic acid)(5)、沒食子

4、酸(gallicacid)(7)。其中，化合物4、5為首次從該植物中分離，化合物1為首次由栗屬植物中分離。
　　采用CCK8法，利用人乳腺癌MCF-7細胞、PC-12神經(jīng)癌細胞、SMMC-7721肝癌細胞對得到的化合物4、5、6三個化合物進行抗癌活性研究。實驗結(jié)果顯示三個化合物對PC-12無明顯抑制作用，對MCF-7、SMMC-7721均有一定的抑制作用。
　　利用HPLC法，同時測定板栗殼中山奈酚、槲皮素、沒食子酸、熊果酸

5、的含量。色譜方法為:InertSustain C18(5um，4.6×250mm)，流動相為乙腈-0.4％磷酸(0～20min,4％～5％;20～21min,5％～28％;21～70min,28％～33％;70～71min,33％～93％;71～90min，93％-95％)，檢測波長為沒食子酸270nm、槲皮素和山奈酚365nm、熊果酸210nm，柱溫30℃，流速0.8ml/min。沒食子酸的線性方程為y=3353.8x+58157，r