母鼠微量鎘暴露對雄性子代性腺分化發(fā)育的影響及其機(jī)制的研究.pdf

1、第一部分:孕期微量染鎘對雄性胎鼠睪丸超微結(jié)構(gòu)及StAR、MIS表達(dá)的影響
　　目的：研究妊娠期微量鎘(Cd)暴露對雄性胎鼠性腺分化發(fā)育的影響及作用機(jī)制。
　　方法：將SD孕鼠16只隨機(jī)分為4組：鎘組(A組)、己烯雌酚組(B組)、鎘加他莫昔酚組(C組)和正常對照組(D組)，每組4只。A組于孕期第9、11、13天隔日腹腔注射氯化鎘1.5mg(kg.d)，B組于妊娠第9-17天隔日皮下注射己烯雌酚100μg/(kg.d)，C組注射

2、氯化鎘的同時(shí)給予雌激素受體拮抗劑他莫昔酚(TMX)50mg/(kg.d)，D組注射與鎘等體積生理鹽水。于妊娠第18天，每個(gè)組行剖宮產(chǎn)取雄性胎鼠，計(jì)錄胎鼠數(shù)量、體長、胎盤重量，計(jì)算雄性胎鼠所占比例；胎鼠睪丸作光、電鏡觀察；免疫組化測定各組胎鼠睪丸間質(zhì)細(xì)胞類固醇激素合成急性調(diào)節(jié)蛋白(StAR)表達(dá)水平；RT-PCR法測定苗勒氏管抑制物(MIS)表達(dá)量。
　　結(jié)果：(1)與正常組比較，各組每只孕鼠每胎平均妊娠胎鼠數(shù)以及雄性胎鼠比例沒有明

3、顯差異(p>0.05)，鎘組和己烯雌酚組胎盤重量、胎鼠體重以及胎鼠體長均低于正常組(p<0.05)；(2)光鏡下，A組和B組睪丸生精小管內(nèi)支持細(xì)胞排列紊亂，間質(zhì)成分增生，C組改變較輕，D組未見明顯的形態(tài)學(xué)改變；(3)電鏡下，A組和B組均可見支持細(xì)胞、生殖母細(xì)胞及間質(zhì)細(xì)胞線粒體腫脹、內(nèi)質(zhì)網(wǎng)擴(kuò)張以及間質(zhì)細(xì)胞內(nèi)脂滴堆積，C組超微結(jié)構(gòu)退變輕于A組和B組；(4)A組和B組間質(zhì)細(xì)胞中StAR陽性產(chǎn)物表達(dá)均顯著低于D組(P<0.05)，C組StAR陽

4、性產(chǎn)物表達(dá)雖低于D組，其差異沒有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05)，但卻明顯高于A組(P<0.05)；(5)各組間MIS表達(dá)差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05)。
　　結(jié)論：(1)鎘是一種環(huán)境內(nèi)分泌干擾因子，其干擾胚胎期雄性大鼠性腺發(fā)育過程的機(jī)制與己烯雌酚相似。
　　(2)鎘對胎鼠性腺分化發(fā)育的影響不是通過MIS的途徑。
　　第二部分:孕期、哺乳期微量染鎘對雄性子代inhibin-B、StAR及睪丸超微結(jié)構(gòu)表達(dá)的影響
　　目

5、的：研究妊娠期及哺乳期微量鎘暴露對雄性仔鼠性腺發(fā)育的影響及作用機(jī)制。
　　方法：將SD孕鼠16只隨機(jī)分為4組：鎘組(A組)、己烯雌酚組(B組)、鎘加他莫昔酚組(C組)和正常對照組(D組)，每組4只。A組于孕期第9、11、13天及產(chǎn)后隔日腹腔注射氯化鎘1.5mg/(kg.d)，B組于妊娠第9-17天及產(chǎn)后隔日皮下注射己烯雌酚100μg(kg.d)，C組注射氯化鎘的同時(shí)給予雌激素受體拮抗劑他莫昔酚50mg(kg.d)，D組注射與鎘等體

6、積生理鹽水。產(chǎn)后30天，每個(gè)組取雄性仔鼠及其右側(cè)睪丸稱重；電子顯微鏡觀察仔鼠睪丸形態(tài)學(xué)改變；免疫熒光法檢測睪丸間質(zhì)細(xì)胞類固醇激素合成急性調(diào)節(jié)蛋白(StAR)表達(dá)水平；RT-PCR法測定抑制素B(inhibin-B)表達(dá)量。
　　結(jié)果：(1)與D組相比，A、B兩組仔鼠體重及睪丸重量降低(P<0.05)；(2)A組和B組睪丸生精上皮均發(fā)生不同程度的發(fā)育阻滯和超微結(jié)構(gòu)損傷，C組超微機(jī)構(gòu)損傷較輕；(3)A、B兩組仔鼠睪丸間質(zhì)細(xì)胞中StAR