不同心肌保護方法對體外循環(huán)下胎羊心功能的影響.pdf

1、目的:通過觀察比較St.Thomas停搏液(STH液)、組氨酸-色氨酸-酮戊二酸停搏液(HTK液)和不停跳對胎羊?qū)嵭畜w外循環(huán)(CPB)術中及術后心肌酶、心肌組織結構、代謝及實驗中其它相關指標的影響，評估這三種方法對胎羊心肌的保護作用，尋求一種適合的胎羊體外循環(huán)心肌的保護方法，從而為臨床胎兒體外循環(huán)提供依據(jù)。
　　方法:18只懷孕山羊（孕100-120 d，足月為150 d），重量為25.72±4.29 kg(17.5-32 kg)

2、，共孕有18只胎羊。分為3組:不停跳組（不停跳組），STH組(St.Thomas保護液組)，HTK組(HTK保護液組)。3組胎羊均采用胸骨前正中切口，完全肝素化后建立CPB行主肺動脈-右心房插管轉(zhuǎn)流，體外循環(huán)回路建立好后開始體外循環(huán)，其中St.Thomas保護液組和HTK保護液組在體外循環(huán)開始后，用主動脈鉗夾閉主動脈開始灌流心肌保護液，不停跳組不灌流心肌保護液?？刂铺パ蝮w外循環(huán)流量在200 ml/kg/min以上，水箱溫度恒定40℃。S

3、t.Thomas保護液組和HTK保護液組使胎羊心臟停跳30分鐘，然后開放升主動脈在并行循環(huán)下使胎羊心臟復跳，30分鐘后撤離體外循環(huán)，觀察2小時，不停跳組轉(zhuǎn)流60 min后停機觀察2h。在CPB前、轉(zhuǎn)流30min、轉(zhuǎn)流60min、停機后1h、停機后2h采頸靜脈血5ml，腋動脈動脈血1ml（測血氣）。胎羊靜脈血均在4℃下4000 rpm離心15min，取上清液，分裝入EP管(每管約0.5ml)，放入-80℃冰箱凍存。在停機后2h，胎羊靜脈注

4、射10％氯化鉀5 ml，使心跳迅速停跳，剪取胎羊右心房心肌組織大小約1×1×1cm，置入含有4％福爾馬林液的試管中密封保存于常溫中，待1周后進行脫水、石蠟包埋，動物實驗完成后用TUNEL統(tǒng)一染色觀察細胞凋亡情況，剪取心室肌若干塊，大小約0.5×0.5×0.5cm用于乳酸和ATP的檢測。分別于轉(zhuǎn)流前(T1)、轉(zhuǎn)流30 min(T2)、轉(zhuǎn)流60 min(T3)、轉(zhuǎn)流結束后1h(T4)、轉(zhuǎn)流結束后2 h(T5)測心率(HR)、平均動脈壓（MA

5、P）、體外循環(huán)轉(zhuǎn)流量、PH值、PaO2、PaCO2、堿剩余(BE)、K+、Na+、Ca2+、血糖(Glu)、乳酸(Lac)、血紅蛋白(Hb)，在各個時間點采集胎羊靜脈血檢驗心肌受損指標:CKMB、鈣蛋白I(cTnI)和肌鈣蛋白T(cTnT)。本次研究采集的所有數(shù)據(jù)均用SPSS21.0統(tǒng)計學軟件處理，計量資料以均數(shù)±標準差(x±s)的方法表示。兩組間差異顯著性檢驗利用單因素方差檢驗(Student's t-test)，多組間顯著性比較采用

6、one-way ANOVA檢驗。
　　結果:
　　1.三組胎羊在各個時間點腋動脈在測得的血氣中，pH、PO2(mmHg)，PCO2(mmHg)、K+(mmol/L)、Ca2+(mmol/L)在各時間點比較均無統(tǒng)計學差異。在T3及T3以后的時段HTK組Na+(mmol/L)要低于STH組；在T3時，HTK組的K+(mmo/L)、Lac(mmol/L)、BE(mmol/L)濃度低于STH組; T4時，HTK組的Hct(％)高于S

7、TH組，有統(tǒng)計學差異。
　　2.體外循環(huán)之前胎羊血清cTnT、cTnI、CKMB濃度分別在三組間比較均無明顯差異。血清cTnI(ng/L)濃度變化，在T1、T2、T3時三組間比較無統(tǒng)計學差異; T4時STH組的cTnI較CPB前明顯升高; T5時不停跳組與HTK組的cTnI均較比CPB前升高; T4和T5時HTK組的cTnI低于STH組; T4時STH組和T5時的STH組、HTK組的cTnI高于不停跳組。
　　3.HTK組和

8、STH組TUNEL陽性細胞數(shù)均較不停跳組組明顯增多，但STH組TUNEL陽性細胞數(shù)較HTK組顯著增多。
　　4.STH組心肌組織ATP含量較不停跳組與HTK降低; HTK組的乳酸含量高于不停跳組; STH組的乳酸含量高于不停跳組和HTK組。
　　結論:胎羊體外循環(huán)中，不停跳對心肌的保護明顯優(yōu)于停跳。在胎羊停跳方面與STH停搏液相比，HTK液在降低心肌代謝、減少心肌損傷標記物的釋放方面有明顯優(yōu)勢，TUNEL標記的細胞凋亡減少，