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1、目的:探討趨化因子CCL17在絨毛滋養(yǎng)細(xì)胞中的表達(dá)及在母胎免疫中的調(diào)節(jié)作用。
方法:收集2015年6月至2015年8月在廣西醫(yī)科大學(xué)第一附屬醫(yī)院自愿要求行人工流產(chǎn)術(shù)的正常妊娠婦女5例,收集絨毛組織,免疫組織化學(xué)法定位檢測(cè)趨化因子CCL17的表達(dá)情況。抽取正常育齡期婦女外周血,分離外周血單個(gè)核細(xì)胞(PBMC),使用0ng/mL(對(duì)照組)、10ng/mL、100ng/mL濃度的重組人CCL17對(duì)正常婦女外周血單個(gè)核細(xì)胞(PBMC)
2、進(jìn)行4次趨化實(shí)驗(yàn),每次設(shè)雙副孔。收集下室細(xì)胞行流式細(xì)胞術(shù),對(duì)比三組趨化后CD4+CCR4+T細(xì)胞、CD4+CCR4+CD25-T細(xì)胞、CD4+CCR4+CD25+T細(xì)胞、CD4+CD25+CD127LOW/-T細(xì)胞、CD4+CD25+CD127LOW/-中CCR4+T細(xì)胞的數(shù)目以及CCR4的表達(dá)率。
結(jié)果:⑴免疫組織化學(xué)結(jié)果:早孕絨毛滋養(yǎng)細(xì)胞表達(dá)CCL17。⑵0ng/mL、10ng/mL、100ng/mL的重組CCL17組遷移
3、到 Transwell小室下室內(nèi)CD4+CCR4+T細(xì)胞的細(xì)胞分別是639±380個(gè)、1188±440個(gè)、1298±396個(gè),10ng/mL組與對(duì)照組間無(wú)差別(P>0.05),100ng/mL組的細(xì)胞較對(duì)照組增多(P<0.05)。⑶0ng/mL、10ng/mL、100ng/mL組遷移到下室的CD4+CCR4+CD25-T細(xì)胞數(shù)分別是423±250個(gè)、618±196個(gè)、701±260個(gè),三組間無(wú)差別(P>0.05)。⑷0ng/mL、10n
4、g/mL、100ng/mL組遷移到Transwell小室下室內(nèi)CD4+CCR4+CD25+T細(xì)胞的細(xì)胞數(shù)分別是212±129個(gè)、564±270個(gè)、593±143個(gè),與對(duì)照組相比,10ng/mL組與100ng/mL組細(xì)胞數(shù)均明顯增多(P<0.05),但10ng/mL、100ng/mL組之間無(wú)差別(P>0.05)。⑸0ng/mL、10ng/mL、100ng/mL的重組CCL17組中到達(dá)Transwell小室下室內(nèi)CD4+CD25+CD127
5、LOW/- T細(xì)胞數(shù)分別是97±50個(gè)、355±148個(gè)、442±38個(gè),與對(duì)照組相比,10ng/mL、100ng/mL組均明顯增多(P<0.05),但10ng/mL與100ng/mL組間比較無(wú)差別(P>0.05)。⑹0ng/mL、10ng/mL、100ng/mL的重組CCL17組中到達(dá)Transwell小室下室內(nèi)CCR4+的CD4+CD25+CD127LOW/- T細(xì)胞數(shù)分別是71±38個(gè)、277±124個(gè)、333±52個(gè),與對(duì)照組相
6、比,10ng/mL、100ng/mL組均明顯增多(P<0.05),但10ng/mL、100ng/mL之間無(wú)差別(P>0.05)。⑺CD4+CD25+CD127 LOW/-T細(xì)胞上CCR4的表達(dá)率均高達(dá)70%以上。0ng/mL、10ng/mL、100ng/mL組表達(dá)率分別為72.7±4.8%,、76.9±4.7%、74.9±6.6%,三組間無(wú)差別(P>0.05)。
結(jié)論:①早孕絨毛滋養(yǎng)細(xì)胞表達(dá)CCL17。②CCL17不能募集CD
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