趨化因子CCL20在干眼小鼠眼表細(xì)胞表達(dá)研究.pdf

1、目的：檢測(cè)趨化生長(zhǎng)因子20（CCL20）在干眼小鼠眼表的表達(dá)及抗CCL20抗體對(duì)小鼠干眼的抑制作用，探索CCL20在干眼發(fā)病中的作用。
　　方法：6周齡C57BL/6小鼠18只，隨機(jī)分為對(duì)照組、干眼PBS注射組、干眼抗CCL20抗體注射組，每組6只。對(duì)照組不做任何處理，PBS注射組及CCL20抗體注射組置恒溫恒濕造模室內(nèi)，給予雙下肢交替注射氫溴酸東莨菪堿及不間斷吹風(fēng)建立干眼模型，兩組分別隔日結(jié)膜下注射25μlPBS及抗CCL20抗

2、體，第11日收集各組小鼠淚液后處死小鼠并分別采集各組小鼠的角膜和結(jié)膜，通過(guò)Real-Time PCR、免疫組化染色、淚液luminex檢測(cè)各組小鼠角膜結(jié)膜組織中CCL20和IL-17的表達(dá)。
　　結(jié)果：
　　1. Real-Time PCR檢測(cè)對(duì)照組、干眼PBS注射組、干眼抗CCL20抗體注射組小鼠角膜CCL20 mRNA分別為：1.00±0.00、1.45±0.11、0.23±0.04。對(duì)照組、干眼PBS注射組、干眼抗CC

3、L20抗體注射組小鼠結(jié)膜CCL20 mRNA表達(dá)分別為：1.00±0.00、6.38±1.86、0.32±0.14。對(duì)照組、干眼PBS注射組、干眼抗CCL20抗體注射組小鼠角膜IL-17mRNA表達(dá)分別為：1.00±0.00、4.05±0.19、1.67±0.34。對(duì)照組、干眼PBS注射組、干眼抗CCL20抗體注射組小鼠結(jié)膜IL-17 mRNA表達(dá)分別為：1.00±0.00、4.08±1.38、0.74±0.29。干眼PBS注射組小鼠角

4、膜和結(jié)膜的 CCL20 mRNA、IL-17 mRNA的表達(dá)明顯高于對(duì)照組和干眼抗CCL20抗體注射組，差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。干眼抗CCL20抗體注射組小鼠的角膜的 CCL20 mRNA、IL-17 mRNA的表達(dá)低于對(duì)照組，差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。
　　2. CCL20濃度，對(duì)照組（50.39±7.65）pg/ml，PBS組(134.45±7.0) pg/ml，抗體組（17.52±5.83）pg/ml，組間差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。淚液IL

5、-17，正常組(100.9±10.12) pg/ml，PBS組(220.88±19.15) pg/ml，抗體組(64.11±5.56) pg/ml，組間差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。
　　3.免疫組化染色（抗CCL20）：干眼PBS注射組眼表細(xì)胞中可見(jiàn)棕褐色顆粒，對(duì)照組及抗CCL20抗體注射組未見(jiàn)。
　　結(jié)論：CCL20參與了小鼠干眼發(fā)病，給予干眼小鼠結(jié)膜下注射抗CCL20抗體，不僅可以抑制干眼小鼠眼表CCL20的表達(dá)，還能抑制干眼炎