卒中后抑郁小鼠模型的建立及評(píng)價(jià).pdf

1、目的：聯(lián)合應(yīng)用大腦中動(dòng)脈阻塞（Middle cerebral artery occlusion，MCAO）和空間行為限制建立卒中后抑郁動(dòng)物模型，探討建立模型的最佳條件并進(jìn)一步驗(yàn)證卒中后抑郁模型的符合抑郁的各項(xiàng)標(biāo)準(zhǔn)，將為卒中后抑郁的機(jī)制研究和臨床藥物提供一個(gè)新的模型。
　　方法：將體重28-30 g的雄性 ICR小鼠隨機(jī)分為假手術(shù)(Sham)組、假手術(shù)+應(yīng)激（Stress）組、缺血再灌注（IR）組和缺血再灌注+應(yīng)激（SIR）組，以大

2、腦中動(dòng)脈阻塞方法建立小鼠缺血再灌注動(dòng)物模型；每天將小鼠放進(jìn)通風(fēng)良好的50毫升試管限制其活動(dòng)2小時(shí)，建立空間限制抑郁模型；聯(lián)合MCAO和空間限制方法建立中風(fēng)后抑郁模型；觀察不同缺血時(shí)間對(duì)小鼠生存率及神經(jīng)功能評(píng)分；應(yīng)用行為學(xué)實(shí)驗(yàn)如強(qiáng)迫游泳實(shí)驗(yàn)(FST)和懸尾實(shí)驗(yàn)(TST)及糖水偏好實(shí)驗(yàn)，觀察小鼠是否存在抑郁樣行為；采用足錯(cuò)誤及抓握實(shí)驗(yàn)，觀察卒中后抑郁對(duì)遠(yuǎn)期神經(jīng)功能恢復(fù)影響；應(yīng)用高效液相色譜法(HPLC)測(cè)定不同腦區(qū)的五羥色胺(5-HT)、多

3、巴胺(DA)等單胺類神經(jīng)遞質(zhì)的含量；采用ELISA試劑盒檢測(cè)小鼠腦組織中的腦源性神經(jīng)生長(zhǎng)因子（BDNF）以及血清皮質(zhì)醇的含量。
　　最后，SIR組小鼠每天給予腹腔注射丙咪嗪(20mg/kg體重)和相同劑量的生理鹽水，2周后觀察行為學(xué)改變，并應(yīng)用ELISA法檢測(cè)皮質(zhì)醇的含量，采用HPLC測(cè)定丙咪嗪對(duì)腦組織中單胺類神經(jīng)遞質(zhì)的影響。
　　結(jié)果：70分鐘缺血引起較高的死亡率；50分鐘缺血小鼠的死亡率較低，但需要較長(zhǎng)時(shí)間的空間限制才能

4、誘導(dǎo)抑郁樣癥狀。因此我們選擇60分鐘作為 MACO缺血時(shí)間。在行為空間限制的第7天，與Sham組及手術(shù)組相比，SIR組小鼠開始表現(xiàn)出不同程度的抑郁樣癥狀（糖水偏好及強(qiáng)迫游泳實(shí)驗(yàn)，P<0.05）,第14天，懸尾實(shí)驗(yàn)及強(qiáng)迫游泳實(shí)驗(yàn)表明模型小鼠的不動(dòng)時(shí)間均明顯延長(zhǎng)；與IR組相比，SIR組小鼠蔗糖水的飲用量顯著下降；SIR組小鼠表現(xiàn)出明顯的神經(jīng)功能恢復(fù)減慢（足錯(cuò)誤次數(shù)明顯增多，而小鼠懸掛的時(shí)間明顯的減少，P<0.05）；SIR組小鼠的體重、腦源

5、性神經(jīng)生長(zhǎng)因子以及腦中神經(jīng)遞質(zhì)（5-HT及 DA）的含量明顯降低，而血清中皮質(zhì)醇的含量則明顯增加,表明 SIR組小鼠存在 HPA軸系統(tǒng)的激活。丙咪嗪治療2周后，小鼠的抑郁樣行為（懸尾實(shí)驗(yàn)，強(qiáng)迫游泳實(shí)驗(yàn)）得到明顯的改善，SIR組小鼠的體重也明顯的增加，模型小鼠的5-HT水平有所增加，而血清皮質(zhì)醇的含量明顯的降低。
　　結(jié)論：我們建立的中風(fēng)后抑郁模型更好地模擬了臨床卒中病人肢體癱瘓行動(dòng)受限造成的抑郁狀態(tài)，該模型能在較短時(shí)間內(nèi)出現(xiàn)，表型