RP-HPLC測定大鼠體內(nèi)D、L-神經(jīng)興奮型氨基酸的含量.pdf

1、目的：
　　建立一種同時(shí)測定大鼠血清和腦組織中D、L-天門冬氨酸、谷氨酸和絲氨酸的高效液相色譜法，通過比較正常組與抑郁模型組血清和腦組織中氨基酸含量的差異，研究探索神經(jīng)興奮型氨基酸與抑郁癥的關(guān)系。
　　方法：
　　柱前手性衍生化試劑：鄰苯二甲醛(OPA)和N-乙酰-L-半胱氨酸(NAC)；色譜條件：色譜柱：Phenomenex C18(250mm×4.6mm，5μm)；流動(dòng)相：50mmol/L醋酸銨(pH6.8)-甲醇

2、(96:4，v/v)，流速：1mL/min；熒光檢測波長：Ex350nm，Em450nm。
　　結(jié)果：
　　D、L-天門冬氨酸、谷氨酸和絲氨酸三對對映異構(gòu)體衍生物的分離度為1.21、2.20和1.53，且不受其他氨基酸異構(gòu)體和內(nèi)源性物質(zhì)的干擾；D、L-天門冬氨酸、D-氨基酸在5～1000ng/mL范圍內(nèi)線性關(guān)系良好，相關(guān)系數(shù)r≥0.9997；L-氨基酸在25～5000ng/mL范圍內(nèi)線性關(guān)系良好，相關(guān)系數(shù)r≥0.9998。應(yīng)

3、用此方法能準(zhǔn)確測定大鼠血清和腦組織中三對神經(jīng)興奮型氨基酸對映體的含量。
　　結(jié)論：
　　建立了一種準(zhǔn)確、可靠且靈敏度高的測定生物樣品中D、L-天門冬氨酸、D、L-谷氨酸和D、L-絲氨酸的分析方法，通過對照組與抑郁模型組實(shí)驗(yàn)測定結(jié)果的分析比較，發(fā)現(xiàn)在抑郁模型組的血清和下丘腦中L-絲氨酸含量明顯降低，而D-絲氨酸含量明顯升高，且有顯著性差異(P<0.05)，而谷氨酸和天門冬氨酸的變化并不明顯。血清中L-絲氨酸含量明顯降低，或D-