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1、目的:建立尿液中多環(huán)芳烴(PAHs)代謝物的高效液相色譜檢測(cè)方法,研究重慶地區(qū)女童青春發(fā)動(dòng)時(shí)相提前與體內(nèi)多環(huán)芳烴(PAHs)暴露水平的關(guān)系。
方法:應(yīng)用高效液相色譜法(HPLC)建立尿液中4種PAHs代謝物,即1-羥基芘(1-OHP),2-羥基萘(2-OHNa),2-羥基芴(2-OHFlu)及9-羥基菲(9-OHPh)的定性和定量檢測(cè)方法;采用目的性抽樣,在重慶市九龍坡區(qū)選取有代表性的四所小學(xué),每所小學(xué)選取1-4年級(jí)女生作為研
2、究對(duì)象,由家長(zhǎng)和女童簽署知情同意書(shū)后,對(duì)目標(biāo)兒童進(jìn)行一般情況的問(wèn)卷調(diào)查、生長(zhǎng)發(fā)育的體格檢查及尿液中4種PAHs代謝物的HPLC檢測(cè)。
結(jié)果:HPLC測(cè)得四種物質(zhì)的保留時(shí)間:1-OHP為2.34min;2-OHNa為2.06 min;2-OHFlu為2.25 min;9-OHPh為2.21 min,1-OHP工作曲線為^Y=0.11X+0.007,r=0.9997,2-OHNa工作曲線為^Y=0.23X+0.087, r=0.9
3、999,2-OHFlu,^Y=0.21X+0.01687, r=0.9998,9-OHPh^Y=0.13X+3.90,r=0.9989。PAHs代謝物測(cè)定方法的加標(biāo)回收率在80%以上,檢測(cè)限為0.1~50ng/ml均滿足實(shí)驗(yàn)要求。四所小學(xué)共調(diào)查女生737名,年齡為(8.81±1.23)歲,其中青春發(fā)動(dòng)時(shí)相提前組209人,正常組528人。尿液PAHs代謝物檢測(cè)結(jié)果顯示,被調(diào)查的737名女生均檢測(cè)出4種PAHs代謝物,其中1-OHP(0.0
4、1~4.77)ng/ml,2-OHNa(0.15~50.00)ng/ml,2-OHFlu(0.06~12.59)ng/ml及9-OHPh(0.29~23.17)ng/ml。PAHs暴露原因分析的結(jié)果顯示,從不或偶爾食用熏制食品組在1-OHP暴露濃度水平上與經(jīng)常食用組差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05),從不或偶爾食用油炸類(lèi)食品組在1-OHP和9-OHPh暴露濃度水平上與經(jīng)常食用組差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05),用過(guò)染發(fā)劑組和未用過(guò)染發(fā)
5、劑組在9-OHPh暴露水平上差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)。青春發(fā)動(dòng)時(shí)相提前組和正常組在2-OHFlu和9-OHPh暴露水平上差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)。
結(jié)論:基于以往研究,建立了尿液中4種PAHs代謝物的HPLC檢測(cè)方法,該方法實(shí)驗(yàn)步驟簡(jiǎn)單,適用范圍較寬,易于推廣,為環(huán)境內(nèi)分泌干擾物的研究提供了一種可行性高的檢測(cè)手段。研究地區(qū)女童青春發(fā)育早期均有PAHs暴露,PAHs暴露可能與經(jīng)常食用熏制類(lèi)和油炸食品,使用過(guò)染
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