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文檔簡(jiǎn)介
1、目的:
1.探究正常胃黏膜上皮組織、高分化胃腺癌、中分化胃腺癌、低分化胃腺癌中LPA1-3的表達(dá)差異水平。
2.探究姜黃素(curcumin)對(duì)正常胃上皮細(xì)胞(GES-1)、高分化胃腺癌細(xì)胞(MKN28)、中分化胃腺癌細(xì)胞(SGC-7901)及低分化胃腺癌細(xì)胞(MKN45)體外增殖的抑制,細(xì)胞凋亡的影響以及遷移侵襲能力的影響。
方法:
1.使用免疫組織化學(xué)染色S-P法觀察LPA1-3在正常胃上皮及
2、高中低分化胃腺癌組織中表達(dá)水平的差異。
2.體外培養(yǎng)正常胃黏膜上皮細(xì)胞(GES-1)、高分化胃腺癌細(xì)胞(MKN28)、中分化胃腺癌細(xì)胞(SGC-7901)及低分化胃腺癌細(xì)胞(MKN45)。
3.Western Blot檢測(cè)細(xì)胞株中LPA1-3表達(dá)水平。
4.MTT比色法檢測(cè)姜黃素對(duì)四種細(xì)胞體外增殖的抑制。
5.Hoechst33342染色觀察細(xì)胞凋亡。
6.Transwell小室觀察姜黃
3、素對(duì)四種細(xì)胞遷移侵襲能力的影響。
7.應(yīng)用Imagepro Plus6.0軟件對(duì)免疫組織化學(xué)染色結(jié)果進(jìn)行分析,所有數(shù)據(jù)使用SPSS20.0進(jìn)行分析。
結(jié)果:
1.免疫組化染色結(jié)果顯示:①.正常組、高中低分化胃腺癌組中LPA2表達(dá)水平均高于LPA1與LPA3(p≤0.05),LPA1與LPA3表達(dá)無顯著差異(p>0.05);②.LPA1在正常組、高中低胃腺癌組中表達(dá)無顯著差異(p>0.05);LPA2在中分化
4、組中表達(dá)低于正常組、高分化組及低分化組(p≤0.05);LPA3在高中低胃腺癌組中表達(dá)均低于正常組(p≤0.05),但在高中低胃腺癌組中表達(dá)無顯著差異(p>0.05)。
2.各濃度的姜黃素均可抑制GES-1、MKN28、SGC-7901、MKN45四種細(xì)胞的增殖,與對(duì)照組對(duì)比均有顯著差異(p≤0.05),且具有時(shí)間劑量依賴性。
3.姜黃素可誘導(dǎo)GES-1、MKN28、SGC-7901、MKN45四種細(xì)胞凋亡的發(fā)生。<
5、br> 4.姜黃素在低濃度(20μ mol/L和40μ mol/L)時(shí)可促進(jìn)GES-1細(xì)胞的遷移及侵襲能力,在高濃度(80μ mol/L)時(shí)抑制;姜黃素可抑制MKN28、SGC-7901、MKN45三種細(xì)胞遷移及侵襲能力,且呈劑量依賴性。
5.Western Blot結(jié)果顯示:在GES-1細(xì)胞中,LPA1高于LPA2和LPA3(p≤0.05),MKN28和SGC-7901細(xì)胞中,LPA2均高于LPA1與LPA3(p≤0.05
6、), MKN45細(xì)胞中,LPA3高于LPA1與LPA2(p≤0.05)。
結(jié)論:
1.LPA2在正常胃上皮組織、高、中、低分化胃腺癌組織中的表達(dá)均高于LPA1與LPA3,在α=0.05水平具有顯著差異。
2.姜黃素可抑制GES-1、MKN28、SGC-7901、MKN45四種細(xì)胞的增殖,并誘導(dǎo)凋亡的發(fā)生。
3.低濃度姜黃素會(huì)促進(jìn)GES-1細(xì)胞遷移及侵襲,在高濃度時(shí)抑制;姜黃素對(duì)高中低分化胃腺癌細(xì)胞
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