丙型肝炎病毒第一高變區(qū)嵌合抗原的純化及其在血液篩查中的應(yīng)用.pdf

1、丙型肝炎病毒(HCV)屬黃熱病毒科，感染人體后可引起機(jī)體免疫應(yīng)答發(fā)生異常，導(dǎo)致組織損傷，形成慢性持續(xù)性感染，并能進(jìn)一步發(fā)展為肝硬化甚至肝細(xì)胞肝癌。HCV整個(gè)基因組呈高度變異，其中位于HCV包膜蛋白E2 N端的27個(gè)氨基酸變異最大，故命名為第一高變區(qū)(HVR1)。
　　 丙型肝炎病毒抗體檢測試劑在血液篩查、臨床疾病診斷中發(fā)揮著重要作用。但由于HCV的高變異，致使現(xiàn)有HCV抗體檢測試劑存在漏檢、中和性抗體難以檢測等問題。軍事醫(yī)學(xué)科學(xué)

2、院基礎(chǔ)醫(yī)學(xué)研究所利用生物信息學(xué)篩選出4條具有高交叉反應(yīng)性的HVR1抗原，并利用自行構(gòu)建的pBV IL1載體進(jìn)行了上述HVR1抗原的嵌合表達(dá)，獲得了1條能覆蓋大部分HVR1抗原變異的嵌合抗原F4HVR1(專利號：ZL0114187916)。
　　 本研究在此基礎(chǔ)上，對嵌合抗原進(jìn)行純化，獲得蛋白純品，鑒定嵌合抗原的活性和特異性，建立了HVR1抗體ELISA檢測技術(shù)。
　　 本研究對北京市紅十字血液中心2008-2009年間的

3、77991名獻(xiàn)血者的ALT和乙肝表面抗原(HBsAg)檢測結(jié)果進(jìn)行了統(tǒng)計(jì)和分析，研究ALT不合格者的性別、年齡、季節(jié)分布特點(diǎn)，并作出了ALT不合格與HBsAg的相關(guān)性分析。
　　 本研究對上述ALT單項(xiàng)不合格中的2035份血清進(jìn)行了HVR1抗體的檢測，并與C區(qū)、NS3區(qū)、NS4區(qū)、NS5區(qū)抗體的檢測作比較，確立HVR1單獨(dú)抗體陽性血清，評價(jià)HVR1抗體檢測在防止HCV血液漏檢中的重要作用；建立了用于評價(jià)HVR1抗體檢測試劑的獻(xiàn)血