西咪替丁對氯氮平在大鼠體內(nèi)的藥代動力學(xué)影響.pdf

1、目的：
　　 建立大鼠血漿中氯氮平的液質(zhì)聯(lián)用檢測的分析方法，研究西咪替丁對氯氮平在大鼠體內(nèi)藥代動力學(xué)影響。
　　 方法：
　　 1、建立氯氮平的液質(zhì)聯(lián)用檢測方法：高效液相色譜儀為Agilent1200系列，包括G1311A四元泵、G1322A在線脫氣機(jī)、G1316A柱溫箱、G1313A自動進(jìn)樣器、G1315B二極管陣列檢測器、Agilent化學(xué)工作站。質(zhì)譜儀為BrukerEsquire系列HCT離子阱質(zhì)譜儀，采用

2、電噴霧離子源(ESI)。色譜條件：色譜柱選用ZorbaxStableBond-C18(2.1mm×50mm，3.5μm)。流動相：A為0.1％甲酸溶液，B為乙腈，梯度洗脫0-1.0min(10-85％B)，1.0-4.5min(85-85％B)，4.5-5.5min(85-10％B)，5.5-8.5min(10-10％B)；流速：0.4mL/min;柱溫：30℃。質(zhì)譜條件：電噴霧電離源(ESI)，正離子化；霧化氣(N2)壓力20psi;

3、干燥氣(N2)流速：6L/min，溫度：350℃；選擇性離子監(jiān)測(SIM)方式；檢測離子為m/z327(氯氮平)，m/z343(內(nèi)標(biāo)三唑侖)?？瞻籽獫{100μL于1.5mLEP管中，加20μL甲醇，加入1μg·mL-1的三唑侖內(nèi)標(biāo)工作液20μL，再加入乙腈200μL，漩渦混勻30s，接著15000r·min-1離心10min，取上清液于自動進(jìn)樣器的樣品瓶中，5μL進(jìn)樣檢測。
　　 2、藥代動力學(xué)試驗(yàn)：健康雄性SD大鼠16只隨機(jī)分

4、成2組，每組8只，分別為：對照組(生理鹽水組)和試驗(yàn)組(西咪替丁組)。對照組大鼠每日腹腔注射生理鹽水0.8mL·kg-1，持續(xù)7天；試驗(yàn)組大鼠每日腹腔注射西咪替丁80mg·kg-1，持續(xù)7天。2組大鼠禁食12h后均灌胃30mg·kg-1的氯氮平。從給藥開始前、給藥后0.083、0.25、0.5、0.75、1、1.5、2、4、8、12、24h采集尾靜脈血0.3ml。液質(zhì)聯(lián)用色譜法分析各點(diǎn)氯氮平血藥濃度，用藥物與統(tǒng)計(jì)軟件DrugAndSta

5、tisticsversion2.0(DAS)分析藥代動力學(xué)參數(shù)，繪制藥物濃度-時(shí)間曲線，并采用相關(guān)數(shù)據(jù)對數(shù)轉(zhuǎn)化，方差齊性檢驗(yàn)，成組t檢驗(yàn)和Wilcoxon非參數(shù)檢驗(yàn)等對兩組藥代動力學(xué)參數(shù)進(jìn)行比較。
　　 結(jié)果：
　　 1、氯氮平純標(biāo)準(zhǔn)品加內(nèi)標(biāo)三唑侖、氯氮平血漿標(biāo)準(zhǔn)品，經(jīng)HPLC-MS分析測定得到的色譜圖，氯氮平與內(nèi)標(biāo)能完全分離，沒有明顯的內(nèi)生雜質(zhì)峰干擾。氯氮平的保留時(shí)間為3.5min，內(nèi)標(biāo)三唑侖的保留時(shí)間為3.9min。

6、氯氮平濃度在10-2000ng·mL-1范圍內(nèi)線性關(guān)系良好(r=0.9990)，最低檢測限達(dá)10ng·mL-1。低、中、高濃度20、100、1000ng·mL-1的日內(nèi)精密度RSD分別為4.580％、2.503％、0.824％;日間精密度RSD分別為6.457％、3.421％、3.406％。低、中、高濃度20、100、1000ng·mL-1的相對回收率試驗(yàn)分別為：101.903±3.841％、100.615±1.347％、99.970±

7、1.208％；絕對回收率分別為：83.955±3.185％、86.387±2.496％、87.646±3.231％。血漿樣品在室溫放置和冰凍保存的條件下，均有很好的穩(wěn)定性。本方法具有較高的專屬性。
　　 2、對照組、試驗(yàn)組氯氮平血藥濃度峰值(Cmax)分別為(538.554±80.647)ng·mL-1和(1406.982±225.578)ng·mL-1;達(dá)峰時(shí)間(Tmax)分別為(0.531±0.16)h和(0.375±0.1

8、34)h；血藥濃度曲線下面積AUC(0-t)分別為(3419.543±567.487)ng·mL-1·h和(8678.86±2068.8)ng·mL-1·h，AUC(0-∞)分別為(3679.817±608.559)ng·mL-1·h和(9241.905±2027.883)ng·mL-1·h:半衰期(t1/2z)分別為(6.061±0.712)h和(6.195±1.514)h；清除率(Clz/F)分別為(8.342±1.318)L·h-

9、1·kg-1和(3.387±0.746)L·h-1·kg-1。試驗(yàn)組氯氮平的AUC(0-t)、AUC(0-∞)和Cmax均顯著大于對照組(P＜0.05)，C1z/F顯著低于對照組(P＜0.05)，兩組氯氮平Tmax、t1/2z比較無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＞0.05)。
　　 結(jié)論：
　　 1、本研究采用的液相色譜-質(zhì)譜聯(lián)用檢測方法快速、簡便、靈敏、準(zhǔn)確可靠，適用于血漿氯氮平測定及其臨床藥代動力學(xué)研究。
　　 2、西咪替丁