雞肝散提取物在大鼠體內(nèi)的藥代動力學研究.pdf

1、雞肝散(Elsholtziablandabenth)又稱四棱蒿、白香薷或四方蒿等，為唇形科香薷屬多年生草本植物，產(chǎn)于云南西南部至東南部溫熱地區(qū)、貴州東南部、廣西的西部及四川等地。資源十分豐富，其葉、花或全草均可入藥。其藥性味苦辛、涼，具有清熱解毒、止血鎮(zhèn)痛等功效，哈尼族民間將其用于治療眼疾病及呼吸道感染，其療效甚佳。 現(xiàn)今研究表明其具有治療腎炎、肝炎、痢疾、急性胃腸炎、牙痛、創(chuàng)傷出血等癥。除此之外還具有抗胸痹癥等抗心血管疾病的功

2、效。雞肝散化學成分復雜多樣，提取分離后，根據(jù)理化性質(zhì)和光譜分析，確定這些化合物為木犀草素，木犀草素-7-O-β-D.葡萄糖苷，木犀草素-5-O-β-D-葡萄糖苷，5-羥基-7,8-二甲氧基黃酮和5-羥基-6,7-二甲氧基黃酮等。 雞肝散提取物中黃酮類化合物的藥理活性顯著，已有較多文獻報道，但是對于提取物中黃酮類化合物吸收、分布、代謝和排泄的研究，即藥物ADME過程則未見報道。藥物ADME揭示了機體對藥物的處置規(guī)律，以及這些處置對

3、藥物療效和毒性的影響，因此研究雞肝散的體內(nèi)藥代動力學具有重要的臨床意義。 目的建立RP-HPLC法測定大鼠生物樣品中雞肝散藥效成分——木犀草素的含量，定量測定木犀草素在大鼠體內(nèi)的藥-時曲線，組織分布以及排泄率，同時定性檢測大鼠血漿、尿、膽汁及糞便中的代謝物的情況，研究雞肝散提取物在SD大鼠中的藥代動力學行為，了解其ADME的情況。 方法 1)吸收： ①取24只雄性SD大鼠，每個時間點4只，采用HPLC法測

4、定給藥后0.17、0.5、1、2、4、6h時，SD大鼠血漿、胃腸道組織中游離木犀草素和總的木犀草素的含量，以獲得胃腸道對于木犀草素苷及苷元的吸收情況。 ②取12只SD大鼠，雌雄各半，灌胃給予雞肝散提取物后，于0.17、0.33、0.5、0.67、0.83、1、2、3、4、5、6、7、8h由尾靜脈取血，血漿樣品經(jīng)酸水解、三氯乙酸沉淀蛋白、乙酸乙酯提取處理后，用RP-HPLC法測定血藥濃度，獲得藥-時曲線及藥動學參數(shù)。 2)

5、分布：取24只雄性SD大鼠，每個時間點4只，測定給藥后0.17、0.5、1、2、4、6h時，SD大鼠各組織中水解后木犀草素的含量，確定這些組織中的分布情況。 3)代謝：取6只雄性SD大鼠，給藥后，其中3只大鼠收集4～6h尿樣及0～24h糞樣，另外3只收集2～4h膽汁樣品，運用UPLC-MS、UPLC-MS/MS和UPLC-PDA這三種手段，確定雞肝散提取物中主要成分木犀草素苷在大鼠體內(nèi)的代謝產(chǎn)物，分析其代謝途徑。 4)排

6、泄：取10只雄性SD大鼠，給藥后，于不同時間段采集尿樣、糞便及膽汁，經(jīng)處理后，以木犀草素為目標物，分別測定其在不同時間段尿樣、糞便及膽汁中的濃度，確定木犀草素在大鼠體內(nèi)的排泄率及排泄途徑。 結(jié)果 1)吸收： ①雞肝散提取物中主要成分木犀草素苷在腸道中迅速水解成木犀草素而被吸收，在胃腸道組織中主要以苷元木犀草素形式存在。 ②木犀草素在SD大鼠體內(nèi)的藥動學行為符合開放二室模型，木犀草素在給藥后1h處達到峰值。

7、經(jīng)大鼠性別和測定時間兩因素方差分析，提示不同性別大鼠的血藥濃度間的差別具有統(tǒng)計學意義。 2)分布：木犀草素經(jīng)吸收后快速分布至各組織，其中代謝比較旺盛的肝、腎組織中木犀草素的含量較心、肺組織中高；腎、心、肺這三個組織中的木犀草素含量均為1h時達最大，這與血藥濃度達峰時間相似；而在肝組織中，藥物分布迅速，0.17h已達高峰；在其它組織中因檢測靈敏度問題而未被檢出。 3)代謝：大鼠尿液中所檢測到的代謝物主要為木犀草素單葡醛酸結(jié)

8、合物、甲基化的木犀草素單葡醛酸結(jié)合物、甲基化的木犀草素硫酸結(jié)合物、木犀草素硫酸結(jié)合物、甲基化的木犀草素以及木犀草素。在膽汁中，代謝物則主要為木犀草素硫酸結(jié)合物、甲基化的木犀草素單葡醛酸結(jié)合物以及木犀草素的葡醛酸硫酸結(jié)合物。在糞便中，則只檢測到了木犀草素。上述代謝物均為木犀草素苷元的二相代謝物，在所有組織，血液中均未檢測到原形藥物木犀草素苷。由此，判斷雞肝散提取物中主要成分木犀草素苷主要是經(jīng)胃腸道水解以后，以苷元木犀草素形式吸收入大鼠體內(nèi)

9、，二相代謝是木犀草素在大鼠體內(nèi)的主要代謝途徑。 4)排泄：木犀草素以二相結(jié)合物的形式由腎經(jīng)尿排出體外，而膽汁中的二相結(jié)合物排入腸道后，在腸道菌群的水解作用下，形成木犀草素，最后通過糞便排出體外。總累積排泄率為37.6％，其中尿中為11.1％，糞便中為26.5％。 結(jié)論 建立的生物樣本中木犀草素含量測定方法具有靈敏、準確、專屬性強等特點，可用于雞肝散藥效成分木犀草素的體內(nèi)藥動學研究。 藥動學研究表明雞肝散提