抗—HCV陰性的HIV感染者血清中HCV RNA、HCV病毒載量及基因型的狀況.pdf

1、目的：了解抗-HCV陰性的廣西HIV感染者血清中HCVRNA的陽(yáng)性率、HCV病毒載量及基因型分布，為今后的丙型肝炎篩查工作及臨床治療提供參考。
　　 方法：1、2008年8月～2009年1月，從廣西省柳州市和欽州市抽取部分的艾滋病VCT門診、監(jiān)獄、戒毒所、醫(yī)院及社區(qū)等作為研究對(duì)象的招募點(diǎn)，共招募到300例HIV-1型感染者。采用自行設(shè)計(jì)的統(tǒng)一問(wèn)卷對(duì)研究對(duì)象進(jìn)行調(diào)查，同時(shí)采集研究對(duì)象靜脈血10ml。另外，作為對(duì)照，41例單純丙型肝

2、炎患者來(lái)自醫(yī)院門診。
　　 2、采用ELISA法檢測(cè)300例HIV-1型感染者血清中的丙型肝炎抗體，按結(jié)果分成抗-HCV(+)組和抗HCV(-)組。
　　 3、從NCBI網(wǎng)站下載廣西及國(guó)內(nèi)主要流行的HCV基因型，采用Clustalx和BioEdit軟件進(jìn)行比對(duì)，獲取各HCV基因型序列的高度保守區(qū)域5'UTR，通過(guò)PrimerExPress5.0軟件設(shè)計(jì)兩對(duì)巢式PCR引物。
　　 4、采用試劑盒對(duì)抗-HCV(+)組

3、和抗-HCV(-)組的血清樣本進(jìn)行HCVRNA的提取，逆轉(zhuǎn)錄成cDNA，再用巢式PCR法檢測(cè)血清的HCVRNA，計(jì)算每組的HCVRNA陽(yáng)性率并比較。
　　 5、采用熒光定量PCR法對(duì)兩組中HCVRNA陽(yáng)性的血清樣本進(jìn)行HCV病毒載量檢測(cè)，與41例單純丙型肝炎患者作比較。
　　 6、采用RFLP法對(duì)兩組的HCVRNA陽(yáng)性血清進(jìn)行HCV基因分型并比較分布情況。
　　 7、數(shù)據(jù)資料用SPSS13.0統(tǒng)計(jì)軟件進(jìn)行統(tǒng)計(jì)分析

4、，兩組率的比較用x2檢驗(yàn)、Fisher確切概率法，兩組間均數(shù)比較用t檢驗(yàn)，三組間均數(shù)比較用方差分析，以P＜0.05為有統(tǒng)計(jì)學(xué)差異。
　　 結(jié)果：
　　 1、在300例HIV感染者中，男195例，女105例，平均年齡為37.39±13.73歲，以性傳播途徑占62.67％(188/300)，吸毒途徑占33.67％(101/300)，其他途徑占3.67％(11/300)。經(jīng)ELISA法檢測(cè)，發(fā)現(xiàn)146例研究對(duì)象呈抗-HCV陽(yáng)性

5、、154例為抗-HCV陰性，表明在廣西HIV感染患者體內(nèi)抗-HCV的陽(yáng)性率為48.67％。在146例HIV/HCV混合感染者中，男性多見(jiàn)，以20-40歲為主，初中文化占多數(shù)，無(wú)固定職業(yè)者居多，大部分為未婚者，不同的傳播途徑其抗-HCV陽(yáng)性率不同，經(jīng)吸毒途徑的抗-HCV陽(yáng)性率為63.7％(93/146)，經(jīng)性傳播途徑為34.93％(51/146)，其他傳播途徑為1.37％(2/146)。
　　 2、在抗-HCV陽(yáng)性組中，檢出114

6、份血清呈HCVRNA陽(yáng)性，陽(yáng)性率為78.08％(114/146)；在抗-HCV陰性組中，檢出41份血清呈HCVRNA陽(yáng)性，HCVRNA陽(yáng)性率為26.62％(41/154)；ELISA法和RT-nPCR法檢測(cè)HCV感染的符合率為75.67％[(113+114)/300]。
　　 3、在HCVRNA(+)的41例抗-HCV陰性患者中，其血清的平均HCV病毒載量對(duì)數(shù)值為6.15±1.33，抗-HCV(+)組的HCV平均病毒載量對(duì)數(shù)值為

7、6.79±1.24，41例單純丙肝感染者為3.44±1.10，三組之間的HCVRNA水平有統(tǒng)計(jì)學(xué)差異(P＜0.05)，以抗-HCV陽(yáng)性組最高，其次是抗-HCV陰性組，最低為單純HCV感染組。結(jié)果還提示在HIV/HCV混合感染者中，三個(gè)不同HCVRNA水平組的HCV抗體陽(yáng)性率并無(wú)差異(P＞0.05)，不能說(shuō)明HCV抗體陽(yáng)性率會(huì)隨著HCV病毒載量的升高而增加。
　　 4、41例抗-HCV(-)組和114例抗-HCV(+)組的HCV基

8、因型分布有統(tǒng)計(jì)學(xué)差異(P＜0.05)，可能與兩組HIV/HCV混合感染者的主要傳播途徑不同有關(guān)。155例HIV/HCV混合感染者血清的HCV基因型呈多樣性分布，主要以1b(34.2％)、混合亞型(17.4％)、6a(12.9％)、3b(9.68％)為主。柳州和欽州地區(qū)的HCV基因型均以1b型占主導(dǎo)，不同傳播途徑中HCV基因型分布不一樣，吸毒者的主要以6a，混合亞型及3b為主，經(jīng)性、母嬰和血液途徑傳播的混合感染者主要以1b及1a+1b混合

9、亞型為主。
　　 結(jié)論：
　　 1.廣西HIV感染者混合HCV感染的現(xiàn)象可能較為嚴(yán)重，年輕、單身、無(wú)固定職業(yè)、多個(gè)性伴侶、吸毒的HIV感染者血清的HCV抗體陽(yáng)性較多，靜脈藥癮、性傳播是廣西HIV/HCV混合感染的主要感染途徑。
　　 2.若單純使用國(guó)產(chǎn)第三代ELISA法檢測(cè)HIV感染者體內(nèi)的HCV抗體會(huì)導(dǎo)致部分丙肝患者被漏診，而且HIV/HCV混合感染者的病毒載量較高。所以今后對(duì)HIV感染者進(jìn)行丙肝篩查時(shí)，對(duì)HC