TNF-α系統(tǒng)在HCV感染中的臨床意義及其與病毒基因型的關(guān)系.pdf

1、目的：丙型肝炎病毒(HCV)感染是全球重大課題之一，是輸血后肝炎的主要病因，急性HCV感染者約50％～85％會(huì)轉(zhuǎn)為持續(xù)性感染，且是引起肝硬化及肝癌的重要因素。HCV感染人體后，宿主免疫系統(tǒng)活化，產(chǎn)生并釋放各種細(xì)胞因子，其中最重要的因子之一是腫瘤壞死因子α(TNF-α)，它不僅可以直接誘導(dǎo)肝細(xì)胞的凋亡，引起肝細(xì)胞炎性反應(yīng)，還可以誘導(dǎo)淋巴細(xì)胞產(chǎn)生IL-2、IL-6、IL-12、IFN-γ等，因此肝組織中出現(xiàn)大量的細(xì)胞因子，形成細(xì)胞因子網(wǎng)絡(luò)的

2、活化，這些細(xì)胞因子促進(jìn)肝內(nèi)炎癥反應(yīng)，介導(dǎo)肝細(xì)胞損傷，從而使肝臟慢性炎癥持續(xù)存在。同時(shí)由于HCV RNA聚合酶缺乏校對(duì)功能，整個(gè)基因組呈現(xiàn)高度的基因異質(zhì)性，致使HCV容易形成準(zhǔn)種變異。新的變種影響抗體和T細(xì)胞的識(shí)別能力，破壞宿主的體液免疫和細(xì)胞免疫功能，影響細(xì)胞因子的產(chǎn)生和釋放，逃避宿主的免疫清除。本文首先分析了HCV感染中血清TNF-α及可溶性腫瘤壞死因子受體Ⅱ(sTNFR<,2>)在不同病情丙型肝炎中的水平。同時(shí)采用限制性片段長(zhǎng)度多態(tài)

3、性分析法(RFLP)對(duì)HCV進(jìn)行基因分型，探討丙型肝炎在我省的基因分布特點(diǎn)，分析基因型與TNF-α、sTNFR<,2>的關(guān)系，為臨床制定治療方案及判斷預(yù)后提供了參考依據(jù)。 方法： (1)病歷選擇和血清收集：慢性丙型肝炎患者62例，清晨空腹肘靜脈采血。收集患者一般資料、肝功能、HCV RNA定量等臨床資料。選擇20例正常人作為對(duì)照。 (2)分別測(cè)定樣本及對(duì)照血清TNF-α及sTNFR<,2>，結(jié)合臨床資料，分析TN

4、F-α系統(tǒng)在HCV感染中所起的作用。 (3)提取各樣本HCV RNA，逆轉(zhuǎn)錄后設(shè)計(jì)引物擴(kuò)增5’非編碼區(qū)(5’NCR)。以5’NCR為目的基因，分別用內(nèi)切酶HaeⅢ、Bsh1236 Ⅰ進(jìn)行酶切得到不同長(zhǎng)度基因片段，分析結(jié)果，確定基因型。 (4)分析TNF-α、sTNFR<,2>水平與基因型的相關(guān)性，探討基因型致病輕重不同的部分機(jī)制。 結(jié)論：丙型肝炎患者血清TNF-α系統(tǒng)與病情輕重有明顯相關(guān)性。TNF-α系統(tǒng)反映機(jī)體