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文檔簡介
1、目的:
1.確定麻藤定喘方水提醇沉的最佳工藝條件。
2.初步篩選麻藤定喘方止咳、平喘的活性部位。
3.建立HPLC法測定麻藤定喘方有效成分群中麻黃堿含量的方法。
4.觀察麻藤定喘方的有效部位對小鼠的急性毒性反應。
方法:
1.采用高效液相色譜法測定含量,以麻藤定喘方中麻黃堿含量和干浸膏得率為指標,使用正交試驗方法對水提及醇沉的工藝條件進行篩選研究。
2、> 2.使用濃氨水致咳法確定止咳的有效部位,應用磷酸組胺和乙酰膽堿混合液引喘法確定平喘的有效部位。
3.應用C18(5μm250mm×4.6 mm)色譜柱,用0.1%磷酸溶液-乙腈(94:6)做為流動相;檢測波長為220 nm;流速為1.0 mL.min-1;柱溫為30℃。
4.以最大濃度藥,最大劑量液灌胃給藥,24 h內(nèi)給藥2次,持續(xù)觀察7天。詳細觀察記錄小鼠的行為活動、狀態(tài)、飲食、大小便、毛色、分泌
3、物及死亡情況等。
結(jié)果:
1.水提最佳工藝參數(shù)為:第一次加足吸水量后再加10倍量水浸泡1小時,其它兩次加10倍量水,提取3次,每次提取1.5小時;醇沉最佳工藝參數(shù)為:乙醇質(zhì)量分數(shù)為60%,靜置時間為24h,濃縮比例為1:1.5。
2.95%和70%的乙醇洗脫部位對小鼠氨水所致的咳嗽有比較明顯的止咳作用;對豚鼠磷酸組胺和乙酰膽堿混合液刺激所致的哮喘有比較明顯的抑制作用。
3.鹽酸麻黃
4、堿檢測濃度在0.32~0.74μg的范圍內(nèi)有良好的線性關(guān)系(r=0.9999),平均回收率為96.4%,RSD=1.92%(n=6)。
4.給藥觀察7天后,動物全部健康存活,沒有表現(xiàn)任何的毒反應,測得麻藤定喘湯有效部位的最大受試藥物量為19.68g/kg,折合生藥為1100.112 g/kg,為臨床患者擬用量的612倍。
結(jié)論:
1.本實驗優(yōu)選出的工藝穩(wěn)定、經(jīng)濟、可行,采用HPLC法操作簡便,分
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