脂溶性化感物質(zhì)生物檢測(cè)方法學(xué)研究及黃檗果皮化感物質(zhì)的初步研究.pdf

1、本論文結(jié)合藥劑學(xué)知識(shí)，將細(xì)胞實(shí)驗(yàn)和動(dòng)物實(shí)驗(yàn)中使用的增溶劑和助懸劑，用于脂溶性化感物質(zhì)的生物檢測(cè)。利用增溶劑和助懸劑能夠增大脂溶性化感物質(zhì)在水中的溶解性的功能，使脂溶性化感物質(zhì)的生物檢測(cè)過(guò)程更安全、準(zhǔn)確。通過(guò)對(duì)吐溫-80(Tween-80)、吐溫-60(Tween60)、吐溫-40(Tween40)、吐溫-20(Tween20)、泊洛沙姆188(F-68)、賣(mài)澤52(S-40)、羧甲基纖維素鈉(CMC-Na)在植物種子萌發(fā)及幼苗生長(zhǎng)實(shí)驗(yàn)中

2、使用的安全性和適用濃度進(jìn)行試驗(yàn)和評(píng)價(jià)得知，吐溫-80(Tween-80)、吐溫-60(Tween-60)、吐溫-40(Tween-40)、泊洛沙姆188(F-68)、賣(mài)澤52(S-40)的安全性較高，而吐溫-20(Tween20)和羧甲基纖維素鈉(CMC-Na)對(duì)受體種子萌發(fā)和幼苗生長(zhǎng)的影響較大。安全濃度范圍分別為，吐溫-80(Tween-80)約14～1000mg/L，吐溫-60(Tween-60)約28～5000mg/L，吐溫-40

3、(Tween-40)約31～1000mg/L；泊洛沙姆188(F-68)約0.2～4.0％；賣(mài)澤52(S-40)約0.5％。通過(guò)考察泊洛沙姆188(F-68)、吐溫-80(Tween-80)、羧甲基纖維素鈉(CMC-Na)增溶或助懸香草醛和阿魏酸對(duì)受體種子進(jìn)行化感生物檢測(cè)得知，脂溶性化感物質(zhì)用泊洛沙姆188(F-68)、吐溫-80(Tween-80)、羧甲基纖維素鈉(CMC-Na)增溶或助懸后，形成的溶液是一個(gè)穩(wěn)定的體系，試驗(yàn)過(guò)程中濃度

4、不發(fā)生變化，可準(zhǔn)確定量考察化感物質(zhì)的活性強(qiáng)度。綜上所述，就安全性而言，吐溫-80(Tween-80)、吐溫-60(Twccn-60)、吐溫-40(Tween-40)、泊洛沙姆188(F-68)、賣(mài)澤52(S-40)的安全性較高；就增溶或助懸效果而言，吐溫-80(Tween-80)、吐溫-40(Tween-40)、泊洛沙姆188(F-68)、賣(mài)澤52(S-40)、羧甲基纖維素鈉(CMC-Na)的增溶或助懸效果較好。最后評(píng)價(jià)出泊洛沙姆188

5、(F-68)的綜合效果最好。 通過(guò)對(duì)黃檗果皮化感物質(zhì)進(jìn)行分離提取和化感活性檢測(cè)得知，黃檗果皮揮發(fā)油的化感抑制作用不顯著，黃檗果皮90％乙醇粗提物的化感抑制作用極為顯著。90％乙醇粗提物硅藻土拌樣后，用正己烷、氯仿、丙酮、95％乙醇、50％乙醇依次洗脫，經(jīng)化感活性檢測(cè)得知，黃檗果皮90％乙醇提取物的95％乙醇組分中含有化感活性物質(zhì)，化感活性生物檢測(cè)顯示，該組分在相當(dāng)于每mL含果皮10～125mg時(shí)，對(duì)供試種子的發(fā)芽勢(shì)和發(fā)芽率產(chǎn)生極

6、顯著的抑制作用，對(duì)苗高、根長(zhǎng)、根重、地上部重也有極顯著的抑制作用，且隨著濃度的增加，抑制強(qiáng)度增強(qiáng)，在高濃度時(shí)能夠完全抑制種子萌發(fā)和幼苗生長(zhǎng)。對(duì)95％乙醇組分進(jìn)行硅膠柱色譜分離，并進(jìn)行化感活性追蹤。在高極性部分分離到大量單體化合物α-D-葡萄糖及具有化感抑制作用的組分，采用高效液相色譜法(HPLC-ELSD)，測(cè)定95％乙醇組分浸膏中α-D-葡萄糖的含量約31.8％。在生物檢測(cè)中發(fā)現(xiàn)，由于α-D-葡萄糖的存在，受體種子發(fā)芽所需時(shí)間延長(zhǎng)，同