黃檗落葉化感物質(zhì)的初步研究.pdf

1、黃檗為蕓香科黃檗屬植物,是常用中藥材關(guān)黃柏的基源植物。由于野生黃檗資源遭到嚴(yán)重破壞,并且通過野外調(diào)查發(fā)現(xiàn)黃檗種群自我更新不良,現(xiàn)已成為瀕危物種。課題組早期研究證實黃檗果皮和落葉中均存在影響黃檗種子萌發(fā)和幼苗生長的物質(zhì)。本實驗通過天然產(chǎn)物化學(xué)結(jié)合生物活性檢測的研究方法,對黃檗落葉中存在的化感物質(zhì)進行分離鑒定及活性檢測,并對黃檗生長地域土壤中的化感物質(zhì)含量進行了初步的探索。
　　 實驗采用小麥種子作為受試植物進行活性篩選,通過天然產(chǎn)

2、物化學(xué)的研究方法,從落葉中分離得到一個影響小麥和黃檗種子萌發(fā)及幼苗生長的物質(zhì),經(jīng)波譜解析和文獻比對,確定該化合物為黃柏苷。生物活性測定結(jié)果表明,黃柏苷能顯著抑制小麥幼苗的生長,但是對小麥種子的萌發(fā)影響較小。黃柏苷在濃度大于0.4mg/ml時對黃檗種子的發(fā)芽率具有極顯著抑制作用,在濃度大于0.2mg/ml時,能顯著抑制黃檗種子發(fā)芽指數(shù)和活力指數(shù),對黃檗幼苗的生長具有極顯著的抑制作用,并隨濃度的增加抑制作用加強。在自然環(huán)境中,黃檗落葉中的物

3、質(zhì)可能會隨雨雪淋洗進入黃檗種子所處的土層中,黃檗種子低溫后熟過程可能會受黃柏苷的影響。本實驗在預(yù)處理黃檗種子時以黃柏苷的水溶液浸種再進行低溫8℃處理。實驗結(jié)果表明,黃柏苷溶液浸種低溫處理的種子發(fā)芽率和發(fā)芽指數(shù)極顯著低于蒸餾水浸種低溫處理的種子發(fā)芽率和發(fā)芽指數(shù),提示黃柏苷可能會影響黃檗種子的后熟過程。
　　 文獻報道黃柏苷在黃檗屬植物落葉中是一種含量較高的成分,實驗測得北京地區(qū)黃檗落葉中黃柏苷的含量為12.12mg/g。黃檗落葉1

4、00mg/ml水浸液中黃柏苷的含量為0.89mg/ml,遠(yuǎn)高于其單體化合物在水中的溶解度。對黃檗生長地域土壤中黃柏苷的含量進行測定,結(jié)果表明10、11月份土壤中黃柏苷的含量較低,經(jīng)過雨雪淋洗和凍土期后,3月份黃柏苷的含量有所升高。4月份黃柏苷的含量又出現(xiàn)下降。實驗結(jié)果提示雨雪淋溶等方式,可能有助于落葉中的黃柏苷釋放到土壤中。
　　 通過對黃檗落葉中的化學(xué)成分進行分析,從中分離得到20個化合物,鑒定了其中18個化合物的結(jié)構(gòu)。其中黃

5、酮類化合物9個,香豆素類化合物7個,甾體化合物2個。通過波譜解析及文獻比對確定這18個化合物的結(jié)構(gòu)分別為:6-甲氧基-7-羥基香豆素(scopoletin,1)；傘形花內(nèi)酯(umbelliferon,2)；phellodenol-A(3)；neophellamuretin(4)；山柰酚(kaempferol,5)；槲皮素(quercetin,6)；胡蘿卜苷(daucosterol,7)；山柰酚-3-O-β-D-葡萄糖苷(kaempfer

6、o-3-O-β-D—glucoside,8)；槲皮素-3-O-β—D-半乳糖苷(quercetin-3-O-β—D—galactoside,9)；hexandraside E(10)；6-(2’-羥基-3’-甲基-3'-丁烯基)香豆素-7-O-β-D-葡萄糖苷(7-O—β-D—glucopyranosyl-6-(2-hydroxy-3-methl-3-butenyl)coumarin,11)；7-(3’-甲基-2’-己烯基-6’-O-β

7、-D-葡萄糖基)香豆素(7-(6’-O-β—D—glucopyranosyl-3'-methyl-2’-hexenyl)coumarin,12)；茵芋苷(skimmin,13)；phellodenol E(14)；黃檗苷(amurensin,15)；黃柏苷(phellamurin,16)；(2R)-phellodensin-F(17)；clerosterol-3-O-β-D—galactopyranoside(18)。其中化合物化合物1