脂質(zhì)輔助的聚合物納米顆粒表面化學(xué)特性對(duì)核酸藥物遞送的影響.pdf

1、在過(guò)去的幾年中，由于基因療法在癌癥、炎癥和其他疾病中的廣泛應(yīng)用，一度認(rèn)為基因療法的“黃金時(shí)代”已經(jīng)到來(lái)。臨床上涌現(xiàn)出大量具有治療效果的治療方案。隨著納米技術(shù)的蓬勃發(fā)展，人們?cè)絹?lái)越重視基于材料的基因遞送納米載體。然而，基因治療的成功受到轉(zhuǎn)運(yùn)障礙的影響，目前還沒(méi)有關(guān)于基因遞送載體的表面化學(xué)特性在生物學(xué)性能中影響的全面研究。在本論文中，我們重點(diǎn)研究了脂質(zhì)輔助的聚合物納米顆粒表面脂質(zhì)結(jié)構(gòu)對(duì)核酸藥物遞送的影響。
　　主要內(nèi)容和結(jié)論分為兩部分

2、:
　　1.已成功設(shè)計(jì)并使用納米顆粒藥物遞送載體以口服方式遞送小干擾RNA(siRNA)用于治療炎性病癥。在本研究工作中，我們利用表面具有胺基團(tuán)的合成脂質(zhì)制備脂質(zhì)相關(guān)的聚（乙二醇）-聚（乳酸-乙醇酸共聚物）(PEG5K-b-PLGA10K)納米顆粒(NPs)。納米載體是通過(guò)雙重乳液法制備，并且它們的表面電荷可以通過(guò)琥珀?；磻?yīng)很好的控制和調(diào)節(jié)，以產(chǎn)生具有不同表面電荷的納米顆粒，同時(shí)保持它們的尺寸和組成。根據(jù)它們的表面電荷將制備的N

3、P稱為胺化（ANP）、普通(PNP)或羧化(CNP)納米顆粒。所有NP均表現(xiàn)出期望的結(jié)構(gòu)穩(wěn)定性和siRNA完整性。ANPs能夠影響RAW264.7細(xì)胞攝取和沉默效率。體內(nèi)研究顯示ANP在發(fā)炎的結(jié)腸組織中有顯著的積聚量，并降低TNF-α分泌和mRNA表達(dá)水平，同時(shí)在急性潰瘍性結(jié)腸炎(UC)的小鼠模型中維持結(jié)腸組織正常。這項(xiàng)工作描述了一種方法來(lái)修飾包封siRNA聚合物納米粒子的表面電荷，并闡述表面電荷對(duì)用于局部炎性疾病口服遞送siRNA的影

4、響。
　　2.基于脂質(zhì)的納米載體是非病毒基因遞送的主要策略之一。脂質(zhì)的摻入并未影響納米載體有效的封裝，細(xì)胞質(zhì)遞送和內(nèi)體逃逸。然而，它們表現(xiàn)出較低的轉(zhuǎn)染效率、毒性和不穩(wěn)定性。在這項(xiàng)工作中，我們制備脂質(zhì)庫(kù)用于合成脂質(zhì)輔助納米粒子。該脂質(zhì)庫(kù)包括兩類脂質(zhì)，即膽固醇和烷基鏈基脂質(zhì)。論文合成了具有不同鏈接基團(tuán)（酰胺，酯）和陽(yáng)離子頭基（脂肪族，芳香族）的基于膽固醇的脂質(zhì)并進(jìn)行了表征（1H NMR和ESI-MS）。論文還制備了微流控裝置以實(shí)施納米