農村菌介導的GS1、GS2基因和P5CS基因轉化苜蓿的研究.pdf_第1頁
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文檔簡介

1、谷氨酰胺合成酶(glutaminesynthetase，GS；E.C.6.3.1.2)是植物和革蘭氏陰性微生物在氨同化過程中的關鍵酶，轉GS基因的植物具有抗除草劑和抗鹽漬等非生物脅迫的特性。二氫吡咯-5-羧化物合成酶(△1-pyrroline-5-carboxylatesynthetase，P5CS)是植物體內合成脯氨酸的關鍵酶，轉P5CS基因的植物對鹽脅迫也表現(xiàn)出了較高的耐受性。本論文研究以隴東苜蓿、甘農1號、甘農3號、新疆大葉四個苜

2、蓿品種為試驗材料，建立了上述苜蓿品種再生體系。特別是由新疆大葉種子誘導愈傷組織，再由愈傷組織形成胚狀體，從而分化成再生植株獲得成功，可以明顯提高再生植株的再生頻率，并可避免產生嵌合體。構建了同時含有兩個谷氨酰胺合成酶(GS1和GS2)基因和P5CS基因，而不含有具有潛在危害的抗性篩選標記基因的植物表達載體p2GS-P5CS。以該表達載體通過農桿菌介導法，轉化新疆大葉品種，利用谷氨酰胺合成酶的有效表達及NaCl同時篩選轉化體，獲得了轉基因

3、苜蓿再生植株。主要研究結果如下： 1.建立四個不同苜蓿品種的再生體系。 2.通過種子—愈傷—胚狀體途徑，優(yōu)化了新疆大葉苜蓿的再生體系。 3.構建了植物表達載體p2GS-P5CS，同時含有兩個谷氨酰胺合成酶(GS1和GS2)基因和P5CS基因，且不含有具有潛在危害的抗性篩選標記基因。 4.用農桿菌介導法轉化苜蓿新疆大葉品種，得到轉基因植株。 5.對轉基因植株進行PCR，PCR-Southern和So

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