轉(zhuǎn)P5CS基因冰草后代植株遺傳穩(wěn)定性分析.pdf

1、本研究以已獲得的P5CS轉(zhuǎn)基因植株及其后代為材料，通過對轉(zhuǎn)基因冰草T0、T1、T2代植株進行分子檢測，確定轉(zhuǎn)基因冰草中目的基因在轉(zhuǎn)基因冰草中的遺傳穩(wěn)定性，為轉(zhuǎn)基因冰草的研究及應(yīng)用提供理論基礎(chǔ);同時將獲得P5CS轉(zhuǎn)基因T0、T1、T2代轉(zhuǎn)基因冰草植株進行鹽脅迫培養(yǎng)并通過抗性檢測確定外源基因在不同世代間表達(dá)是否穩(wěn)定。為新抗性種質(zhì)資源創(chuàng)制、轉(zhuǎn)基因冰草的研究應(yīng)用及轉(zhuǎn)基因冰草新品種選育提供理論基礎(chǔ)。
　　本研究的結(jié)果如下:
　　(1)

2、 PCR分析、點雜交和Southern雜交結(jié)果表明，轉(zhuǎn)基因冰草T0、T1、T2代植株基因組中均含有P5CS基因，三代轉(zhuǎn)基因冰草植株中P5CS基因的整合數(shù)均為1～2。檢測的植株中T0遺傳轉(zhuǎn)化率為31.82％，其后代(T1、T2代)遺傳轉(zhuǎn)化率分別為26.31％和29.17％，證明P5CS基因在轉(zhuǎn)基因冰草植株中能穩(wěn)定遺傳。
　　(2)在鹽脅迫下，T0、T1、T2代轉(zhuǎn)基因冰草植株與對照植株相比，葉片相對含水量均逐漸下降、游離脯氨酸含量均增

3、加、葉綠素的含量整體呈先降后升、可溶性蛋白含量均緩慢下降，以上指標(biāo)T0、T1、T2代轉(zhuǎn)基因植株變化幅度均一直高于對照;植株細(xì)胞膜透性均增加、丙二醛含量在第一周升高第二周回落，這兩個指標(biāo)顯示T0、T1、T2代轉(zhuǎn)基因植株變化幅度均小于對照植株。在酶系統(tǒng)方面，SOD、POD、CAT活性整體先升后降，活性均高于對照。T0、T1、T2代冰草轉(zhuǎn)基因植株間總體上沒有顯著差異。說明轉(zhuǎn)P5CS基因T0、T1、T2代冰草的耐鹽性明顯增加，在T0、T1、T2