趕山鞭抑制血管生成的有效成分及初步毒理研究.pdf

1、本文分為三個部分，第一部分為趕山鞭（Hypericumattenuatum）的化學成分研究。第二部分為趕山鞭抑制血管生成的有效成分研究。第三部分為趕山鞭有效成分的初步毒理研究。
　　 方法：
　　 ①利用現(xiàn)代色譜技術對趕山鞭（Hypericumattenuatum）95％乙醇提取物進行分離，通過物理化學和光譜學方法鑒定結構。②采用MTT實驗法檢測quercetin,rutin,hyperin，quercertin-3-O

2、-α-L-arabinofuranoside,quercertin-3-O-β-D-glucoside五種化合物對人臍靜脈內(nèi)皮細胞(HUVEC)的抑制血管生成活性；化合物濃度梯度為0.1、1、5、10、50、100μg·mL-1;③采用斑馬魚胚胎毒性實驗檢測quercetin，rutin，hyperin，quercertin-3-O-α-L-arabinofuranoside，quercertin-3-O-β-D-glucoside五種

3、化合物對斑馬魚胚胎的毒性；化合物濃度梯度為1、2、4、8、16、32μg·μl-1。
　　 結果：
　　 ①從趕山鞭（Hypericumattenuatum）95％乙醇提取物中分離得到7個化合物，通過物理化學和光譜學方法鑒定結構分別為：quercetin，rutin，hyperin，quercertin-3-O-α-L-arabinofuranoside,quercertin-3-O-β-D-glucoside,quer

4、certin-3’-O-β-D-glucoside.quercertin-4’-O-β-D-glucoside.
　　 ②HUVEC細胞的MTT檢測表明，在0.1、1、5、10、50、100μg·mL-1濃度梯度范圍內(nèi)，quercetin，rutin對HUVEC細胞均有生長抑制效應。quercetin濃度＜1μg·mL-1時不顯著，≥1μg·mL-1時極顯著(p＜0.01);rutin在此濃度范圍內(nèi)均極顯著(p＜0.01)；hy

5、perin，quercertin-3-O-α-L-arabinofuranoside在濃度＜5μg·mL-1時對HUVEC細胞有生長抑制效應，在濃度≤0.1μg·mL-1時對HUVEC細胞有極顯著生長抑制效應(p＜0.01)。在濃度＞5μg·mL-1時對HUVEC細胞有極顯著的生長促進效應(p＜0.01)。
　　 quercertin-3-O-β-D-glucoside在濃度＜1μg·mL-1時，對HUVEC細胞有生長抑制效應。

6、在濃度≤0.1μg·mL-1時，對HUVEC細胞有顯著生長抑制效應(p＜0.05)，在濃度＞5μg·mL-1時，對HUVEC細胞有生長促進效應。在濃度＞10μg·mL-1，對HUVEC細胞有顯著的生長促進效應(p＜0.05)．在濃度＞100μg·mL-1，對HUVEC細胞有極顯著的生長促進效應(p＜0.01)．
　　 5種化合物均不呈劑量依賴效應。
　　 ③斑馬魚胚胎毒性研究結果表明，72hpf,在1、2、4、8、16、

7、32μg·μl-1濃度梯度范圍內(nèi)，quercetin，rutin，hyperin，quercertin-3-O-α-L-arabinofuranoside，quercertin-3-O-β-D-glucoside對斑馬魚胚胎致死致畸效應明顯，隨著濃度遞增，死亡率、畸形率均升高，且呈現(xiàn)一定的劑量依賴效應。72hpf,quercetin，rutin,hyperin，quercertin-3-O-α-L-arabinofuranoside，q

8、uercertin-3-O-β-D-glucoside顯著抑制孵化，隨著濃度遞增，抑制愈加明顯，呈現(xiàn)一定的劑量依賴效應。
　　 結論：
　　 ①對藤黃科(Guttiferae)金絲桃屬植物趕山鞭（Hypericumattenuatum）95％乙醇提取物進行分離，得到7個單體化合物，對其進行了結構鑒定。
　　 ②quercetin，rutin有一定程度的抑制HUVEC細胞生長的作用；hyperin，quercert

9、in-3-O-α-L-arabinofuranoside,quercertin-3-O-β-D-glucoside,quercertin-3’-O-β-D-glucoside，quercertin-4’-O-,β-D-glucoside有一定程度的抑制HUVEC細胞生長和促進HUVEC細胞生長的作用。
　　 ③quercetin,rutin,hyperin,quercertin-3-O-α-L-arabinofuranoside