兼性嗜熱古地分枝桿菌X7C脫有機(jī)硫關(guān)鍵酶黃素還原酶的純化和性質(zhì)分析.pdf

1、山東大學(xué)碩士學(xué)位論文兼性嗜熱古地分枝桿菌X7C脫有機(jī)硫關(guān)鍵酶黃素還原酶的純化和性質(zhì)分析姓名：鄭媛申請(qǐng)學(xué)位級(jí)別：碩士專業(yè)：微生物學(xué)指導(dǎo)教師：許平20050527山東大學(xué)碩士畢業(yè)論文在N A D H 存在和N A D P H 存在時(shí)的活力相當(dāng)，在F A D 存在時(shí)的活力是在F M N 存在時(shí)活力的3 0 ％左右。底物N A D H 的如值為4 9 0 ．1 I x M 。另外，通過(guò)使用分子篩測(cè)定活性相對(duì)分子質(zhì)量的方法，發(fā)現(xiàn)活性蛋白的分子質(zhì)量

2、也在3 5K D a 左右，說(shuō)明此蛋白可能是單亞基成分。在得到蛋白質(zhì)的N 端序列，設(shè)計(jì)出簡(jiǎn)并引物后，利用基因組文庫(kù)的方法來(lái)篩選基因序列是最為常規(guī)的方法。使用的p U C l 9 質(zhì)粒載體，插入片段在4 - 6k b 之間以下。使用同尾酶S a u 3 A I 對(duì)X 7 C 基因組進(jìn)行了酶切，并且采用C I A P ( A l k a n i n e P h o s p h a t a s e ) 處理，制備高效率感受態(tài)細(xì)胞和插入片段提純