雞源益生菌的分離、篩選、鑒定與特性研究.pdf

1、該實(shí)驗(yàn)內(nèi)容是該項(xiàng)目的一部分,主要研究了從雞的腸道中分離篩選出五種腸道菌,初步鑒定為腸道益生菌,在此基礎(chǔ)上對(duì)各菌株的發(fā)酵特性進(jìn)行探討,并對(duì)各菌株拮抗致病菌和抗生素進(jìn)行了探討.同時(shí)也探討了篩選出的菌株間的拮抗性及相容性.選用BS培養(yǎng)基,從15天齡小雞的盲腸中分離篩選出雙歧桿菌.選用SL培養(yǎng)基,從10天齡小雞的小腸中分離篩選出乳酸桿菌.選用EC培養(yǎng)基,從30天齡小雞的盲腸中分離篩選出屎腸球菌.選用BLI培養(yǎng)基,從30天齡小雞的盲腸中分離篩選出

2、地衣芽孢桿菌.選用麥牙汁培養(yǎng)基,從成年雞的盲腸中分離篩選出酵母菌.對(duì)分離篩選獲得的五種菌株進(jìn)行初步鑒定:菌株B171是雙歧桿菌,菌株M16是嗜酸乳桿菌,菌株W019是屎腸球菌,菌株YB02是地衣芽孢桿菌,菌株BT21是酵母菌.雙歧桿菌B171為革蘭氏陽(yáng)性嚴(yán)格厭氧菌,最佳培養(yǎng)條件是初始pH值7.0,最適培養(yǎng)溫度為40℃.采用正交實(shí)驗(yàn)方法,確定最佳培養(yǎng)基配方為酵母膏0.9﹪,胰蛋白胨0.65,大豆蛋白胨0.6﹪,葡萄糖2.5﹪,雙歧因子0.

3、2﹪,生長(zhǎng)因子10﹪.發(fā)酵培養(yǎng)時(shí)期18h.在最佳培養(yǎng)條件下,B171的增殖菌數(shù)可達(dá)6.2×10<'8>個(gè)/mL.嗜酸乳桿菌M16為革蘭氏陽(yáng)性兼性厭氧菌,發(fā)酵培養(yǎng)時(shí)期16h,增殖菌數(shù)可達(dá)7.1×10<'8>個(gè)/mL.屎腸球菌W019為革蘭氏陽(yáng)性兼性厭氧菌,發(fā)酵培養(yǎng)時(shí)期16h,增殖菌數(shù)可達(dá)8.3×10<'8>個(gè)/mL.地衣芽孢桿菌YB02為革蘭氏陽(yáng)性好氧菌,其最佳培養(yǎng)條件為初始pH值6.5,最適培養(yǎng)溫度30~32℃.采用正交實(shí)驗(yàn)方法,確定最

4、優(yōu)培養(yǎng)基為酵母膏1.5﹪,玉米淀粉2.0﹪,NaH<,2>PO<,4>+Na<,2>HPO<,4>0.2﹪+0.2﹪,玉米漿2.0﹪.發(fā)酵培養(yǎng)時(shí)間18~20h,此時(shí)增殖菌數(shù)可達(dá)3.5×10<'9>個(gè)/mL.酵母菌BI21的發(fā)酵培養(yǎng)時(shí)間為18~20h,此時(shí)增殖菌數(shù)可達(dá)1.24×10<'8>個(gè)/mL.拮抗抗生素實(shí)驗(yàn)表明,雙岐桿菌B171對(duì)丁胺卡那霉素、新霉素、巴龍霉素有耐藥性,對(duì)青霉素、萬(wàn)古霉素、林可霉素和桿菌肽敏感.乳酸桿菌M16對(duì)丁胺卡