2-o-β-d-葡萄糖基-L-抗壞血酸及其類似物的合成和降血糖活性研究.pdf

1、糖尿病屬慢性代謝性疾病，與心腦血管疾病密切相關(guān)。隨著人們生活水平的提高，糖尿病患者日益增加，人類的生命健康正面臨著巨大威脅。然而，糖尿病目前尚無有效的治愈方法，只能依賴藥物維持血糖，因此尋找新的療效顯著、安全可靠的降血糖藥物具有十分重要的意義。
　　2-O-β-D-葡萄糖基-L-抗壞血酸（AA-2βG）是天然產(chǎn)物枸杞中的一種成分，其特有的β構(gòu)型的糖苷鍵可對α-葡萄糖苷酶產(chǎn)生抑制作用，同時可在體內(nèi)緩慢水解產(chǎn)生抗壞血酸，對機體及內(nèi)臟器

2、官起到一定的保護作用?；谝陨咸攸c，我們推測該類藥物可能具備降血糖的功效，本課題主要通過體外酶抑制活性研究和小鼠活體實驗，考察AA-2βG及其類似物的降血糖活性。本論文的研究內(nèi)容包括:
　　1.對已報道的AA-2βG合成路線進行了優(yōu)化，通過溴代四乙?；咸烟呛?，5，6-位保護的抗壞血酸的糖苷化反應(yīng)及相應(yīng)的脫保護步驟，將AA-2βG的總產(chǎn)率從13％提高到了50％。在最優(yōu)反應(yīng)條件下，利用不同的糖類作為糖基供體實現(xiàn)了3-O-β-D-葡

3、萄糖基-L-抗壞血酸(AA-3βG)和2-O-β-D-半乳糖基-L-抗壞血酸(AA-2βGal)的合成，豐富了產(chǎn)物類型。
　　2.進行了體外酶抑制活性實驗。研究發(fā)現(xiàn)AA-2βG、AA-2βGal、AA-3G對釀酒酵母源α-葡萄糖苷酶均具備一定的抑制能力，抑制類型均為競爭性抑制。AA-2βG（IC50=0.98mmol/L）與AA-2βGal（IC50=1.15mmol/L）對釀酒酵母源α-葡萄糖苷酶的抑制效果均優(yōu)于阿卡波糖（IC5

4、0=4.54mmol/L）。分子對接結(jié)果顯示AA-2βG結(jié)合了釀酒酵母源α-葡萄糖苷酶ASP214、GLU276、ASP349三個主要氨基酸活性位點，AA-2βGal則結(jié)合了GLU276活性位點，AA-3βG與氨基酸位點ASP349結(jié)合。進一步驗證上述實驗結(jié)果:三種抗壞血酸糖苷類化合物對酵母源α-葡萄糖苷酶為競爭性抑制，且抑制能力從小到大的順序為:AA-3βG、AA-2βGal、AA-2βG。三種抗壞血酸糖苷類化合物對α-淀粉酶無明顯抑

5、制效果;而對小鼠小腸上皮細胞中提取的腸酶有不同程度的抑制，其中AA-3βG抑制效果最佳，IC50值為67.19mmol/L。
　　3.通過小鼠活體實驗研究了AA-2βG及其類似物的降血糖功效。實驗結(jié)果表明，AA-2βG、AA-2βGal、AA-3βG對正常小鼠和糖尿病小鼠的餐后血糖有改善功能。糖耐量實驗發(fā)現(xiàn):對服用麥芽糖的正常小鼠分別灌胃AA-2βGal和AA-3βG，30min時血糖上升率與空白對照組50％相比僅為35％，且在1

6、h后恢復(fù)至空腹血糖值;對服用淀粉的正常小鼠分別灌胃AA-2βG和AA-2βGal，30min時血糖上升率與空白對照組64％相比僅為20％，且在2h后恢復(fù)至空腹血糖值。對服用麥芽糖的糖尿病模型小鼠分別灌胃三種抗壞血酸糖苷藥物，30min時空白對照組血糖上升率為46％，而三種抗壞血酸糖苷藥物組血糖上升率均在10％左右，80min后幾乎都降低到空腹血糖水平及以下;對服用淀粉的糖尿病模型小鼠分別灌胃三種抗壞血酸糖苷藥物，30min時空白對照組血