坎地沙坦西酯片人體藥動學和生物等效性及坎地沙坦吸收機制的研究.pdf

1、坎地沙坦(Candesartan,CDS)是一種新型的作用于腎素-醛固酮系統(tǒng)的抗高血壓藥物,它對血管緊張素Ⅱ1型受體有強親和力,可選擇性地阻斷該受體的作用,從而阻斷血管緊張素Ⅱ的血管收縮作用,減少醛固酮分泌,達到降壓效果。由于CDS口服吸收差,臨床應用多為其前體藥物——坎地沙坦西酯(CandesartanCilexetil,CC),CC在胃腸道吸收過程中迅速完全轉化為CDS。CC用于治療原發(fā)性高血壓、心力衰竭、高血壓合并左心室肥厚、糖尿

2、病腎病等多種疾病,療效肯定。本課題建立了人血清中CDS的高效液相-熒光檢測(HPLC-Flu)方法,用該方法考察了中國健康男性志愿者口服8mgCC片后的藥動學參數(shù),并對兩種制劑的生物等效性進行了評價;另外還應用Caco-2細胞模型和大鼠在體腸吸收模型對CDS的吸收機制進行了初步研究。
　　 課題的第一部分建立和驗證了HPLC-Fiu測定人血清中CDS濃度的方法。以萘普生為內標(I.S),血清用液.液萃取進行處理。色譜柱:YMC(

3、R)ODS柱(250mm×4.6mm,5μm);柱溫:30℃;流動相:10mmol/L磷酸二氫鉀溶液(磷酸調pH為3.0):乙腈=60:40(V/V);流速:1.0mL/min;熒光檢測波長:激發(fā)波長270nm,發(fā)射波長390nm;進樣量:20μL。血清內源性雜質對樣品的測定沒有干擾。CDS與I.S的色譜保留時間分別為10.4min和16.5min。CDS在1.01～202ng·mL-1。范圍內線性良好(r=0.9998),最低定量濃度

4、為1.01ng·mL-1。CDS的日內、日間精密度和準確度良好,樣品長期凍融(45天)和多次凍融(n=3)穩(wěn)定性良好。該方法快速、靈敏、準確,可用于臨床藥動學及生物等效性研究。
　　 課題的第二部分考察了中國健康男性志愿者口服8mgCC片后的藥動學參數(shù),并對兩種制劑的生物等效性進行了評價。20名受試者隨機編號分為兩組,交叉口服給藥進行試驗,血樣測定采用第一部分建立的HPLC-Fiu法。結果顯示,20名健康男性志愿者單劑量口服CC

5、試驗片和參比片8mg后藥動學參數(shù)分別為:AUC0-1(ng·hr·mL-1):943.94±382.60和923.67±350.39;AUC10-∞(ng·hr·mL-1):979.72±380.41和967.95±353.61;Cmax(ng·mL-1):90.36±40.45和91.52±39.69;Tmax(h):3.98±1.26和4.13±0.60;t1/2(h):10.18±1.26和10.43±2.58。統(tǒng)計結果顯示:Tm

6、ax經非參數(shù)統(tǒng)計(Wilcoxon檢驗),試驗制劑與參比制劑之間無顯著性差異;試驗片和參比片的AUC0～t,AUC0-∞和Cmax經多因素方差分析(ANOVA)無顯著性差異。由雙單側t檢驗計算90％置信區(qū)間,試驗片AUC0-t的90％置信區(qū)間落在對照參比制劑的90.28％～113.90％范圍內,AUC0-∞的90％置信區(qū)間落在對照參比制劑的89.99％～112.25％范圍內,Cmax的90％置信區(qū)間落在對照參比制劑的86.03％～111

7、.07％范圍內,試驗制劑與參比制劑生物等效。本實驗得到的中國志愿者的藥動學參數(shù)與文獻報道的歐洲志愿者的參數(shù)基本吻合。CDS個體間藥動學差異較大。
　　 課題的第三部分考察了CDS在Caco-2細胞模型中的攝取及轉運機制。研究結果表明,CDS在Caco-2細胞中的攝取主要為被動擴散的方式:在pH6.0-8.0的介質環(huán)境中,藥物的攝取和轉運無pH依賴性;不同濃度CDS的吸收表觀通透系數(shù)Papp平均值為(2.18×10-6)cm·se

8、c-1;加入P-糖蛋白(P-glycoprotein)抑制劑環(huán)孢素A和維拉帕米能顯著地提高CDS的吸收,同時降低CDS的分泌,表明CDS的吸收過程可能受到P-gp的外排作用。
　　 課題的第四部分考察了CDS在大鼠在體腸吸收模型中的吸收情況。結果顯示,CDS在大鼠不同腸斷(十二指腸、空腸、回腸)的吸收速率常數(shù)(Ka)和有效透皮系數(shù)(Peff)無顯著性差異,說明CDS無特殊的吸收窗;濃度范圍0.2～25μg·mL-1的CDS在空腸