山東甜菜夜蛾抗藥性監(jiān)測及應(yīng)用cPASA技術(shù)檢測高效氯氰菊酯的抗性.pdf

1、甜菜夜蛾(Spodoptera exigua(Hübner)是一種世界性農(nóng)業(yè)害蟲，近年來在山東地區(qū)頻繁發(fā)生、危害嚴(yán)重，尤其是對蔬菜、棉花等經(jīng)濟(jì)作物。目前甜菜夜蛾的防治以化學(xué)防治為主，而長期單一的化學(xué)防治使甜菜夜蛾對許多殺蟲劑產(chǎn)生了抗藥性。本研究采用了浸葉法監(jiān)測了山東的泰安、章丘、安丘、滕州和濱州五地區(qū)甜菜夜蛾種群對11種防治藥劑的抗性。在監(jiān)測中發(fā)現(xiàn)，傳統(tǒng)的生物測定檢測法存在著工作量大、不適于早期抗性檢測等缺點(diǎn)，因此在明確甜菜夜蛾對菊酯抗

2、性是與鈉離子通道基因IIS6上亮氨酸到苯并氨酸突變(L1014F)緊密有關(guān)的基礎(chǔ)上，設(shè)計(jì)了相應(yīng)的競爭性等位基因PCR方案(cPASA)，用于田間甜菜夜蛾對高效氯氰菊酯的抗性檢測，并與浸葉法進(jìn)行了相關(guān)性分析。主要結(jié)果如下:
　　 1、甜菜夜蛾的抗藥性監(jiān)測
　　 采用浸葉法測定了2011、2012年山東泰安、章丘、安丘、滕州和濱州五地區(qū)甜菜夜蛾種群對11種殺蟲劑（氯蟲苯甲酰胺、氟蟲雙酰胺、甲維鹽、溴蟲腈、多殺菌素、茚蟲威、蟲

3、酰肼、甲氧蟲酰肼、氟啶脲、高效氯氰菊酯和毒死蜱）的敏感性。結(jié)果表明:(
　　 )2011、2012年田間甜菜夜蛾各地種群對不同種類殺蟲劑表現(xiàn)出不同抗性水平。氯蟲苯甲酰胺和氟蟲雙酰胺是近年在甜菜夜蛾上使用的高效殺蟲劑，對甜菜夜蛾有較高的毒力，LC50值均＜10.00mg/L。對氯蟲苯甲酰胺安丘種群沒有檢測到抗性，其他四地區(qū)發(fā)現(xiàn)非常低到中等水平抗性，其中2012年濱州種群抗性最高，抗性倍數(shù)也僅為28.77倍。氟蟲雙酰胺抗性規(guī)律類似于

4、氯蟲苯甲酰胺，相比于2011年，甜菜夜蛾對這兩種藥劑抗性均有所上升。雖然在五地區(qū)均監(jiān)測到甜菜夜蛾對甲維鹽產(chǎn)生了非常低到中等水平抗藥性，但甜菜夜蛾對甲維鹽仍保持非常高的敏感性，LC50＜1.00mg/L。對溴蟲腈兩年均沒有監(jiān)測到抗性存在，抗性倍數(shù)RR＜2。對茚蟲威、多殺菌素甜菜夜蛾表現(xiàn)低到高的不同水平抗性，抗性倍數(shù)分別介于8.64-84.19倍、9.23-86.31倍，其中對茚蟲威安丘種群抗性有明顯上升，由29.76上升到49.03，對多

5、殺菌素濱州種群抗性有明顯上升，由38.99上升到68.14。
　　 對昆蟲生長調(diào)節(jié)劑類殺蟲劑蟲酰肼、甲氧蟲酰肼和氟啶脲表現(xiàn)出高到非常高水平抗性，其中氟啶脲的抗性最為突出，抗性倍數(shù)RR＞200，這表明甜菜夜蛾對氟啶脲變得非常不敏感，不適于田間繼續(xù)使用。對蟲酰肼抗性倍數(shù)RR介于52.03-125.87，對甲氧蟲酰肼抗性倍數(shù)RR介于131.25-675.00。對擬除蟲菊酯高效氯氰菊酯的抗性，2011年抗性倍數(shù)為54.88-183.77

6、，2012年抗性倍數(shù)為62.23-146.82，其中滕州、泰安、章丘和安丘表現(xiàn)出緩慢下降趨勢，這可能與菊酯藥劑的使用減少有關(guān)。甜菜夜蛾對毒死蜱的抗性在監(jiān)測五地區(qū)均表現(xiàn)出非常高水平的抗性，抗性倍數(shù)為106.29-349.51，雖然毒死蜱的抗性在監(jiān)測藥劑中不是最高的，但對甜菜夜蛾的敏感性最低，大部分地區(qū)的LC50＞1000mg/L。
　　 監(jiān)測地區(qū)殺蟲劑選擇壓的不同和甜菜夜蛾的遷飛習(xí)性可能是造成甜菜夜蛾對不同藥劑抗性水平差異的主要原

7、因，此外不同地區(qū)的耕作制度和藥劑之間的交互抗藥性可能也是抗性產(chǎn)生原因。
　　 2、競爭性等位基因PCR檢測高效氯氰菊酯的抗性
　　 以甜菜夜蛾的敏感種群和高效氯氰菊酯抗性種群為材料，通過對鈉離子通道基因片段的序列分析，發(fā)現(xiàn)了與擊倒抗性相關(guān)的亮氨酸到苯丙氨酸(L1014F)的突變，并建立(L1014F)突變的競爭性特異等位基因PCR檢測技術(shù)(cPASA)。結(jié)果表明:敏感種群個(gè)體均沒有發(fā)現(xiàn)突變等位基因，田間章丘種群92％個(gè)體