參麥注射液及其有效成分對(duì)藥物代謝酶的影響.pdf

1、細(xì)胞色素P450是重要的Ⅰ相藥物代謝酶系統(tǒng)，參與一系列親脂性化合物的代謝，包括藥物、致癌物及環(huán)境污染物的代謝轉(zhuǎn)化。參麥注射液通過(guò)對(duì)肝臟P450酶的誘導(dǎo)或抑制可與其他藥物產(chǎn)生相互作用。同時(shí)參麥注射液對(duì)心臟P450酶的調(diào)節(jié)作用，有助于發(fā)現(xiàn)其心血管治療作用新的途徑或靶點(diǎn)。
　　本課題首先研究了參麥注射液對(duì)大鼠肝臟細(xì)胞色素P450酶的影響，采用超速離心法制備大鼠的肝微粒體，與探針?biāo)幬锕卜跤?，?yīng)用液相色譜-質(zhì)譜(LC/MS)測(cè)定各同工酶特異

2、性底物在大鼠肝微粒體的代謝產(chǎn)物的生成量，以此來(lái)測(cè)定各同工酶的酶活性。應(yīng)用RT-PCR方法，檢測(cè)參麥注射液對(duì)藥物代謝酶mRNA表達(dá)的影響。結(jié)果顯示:參麥注射液可增加CYP286、2C9酶活性，對(duì)CYP1A2、3A酶活性無(wú)明顯影響;紅參注射液對(duì)CYP1A2、286和2C9酶活性具有明顯誘導(dǎo)作用，對(duì)CYP3A酶活性無(wú)影響;麥冬注射液能誘導(dǎo)CYP2C9酶活性。各處理組mRNA水平變化顯示，參麥注射液能誘導(dǎo)CYP1A2、2B、2C的表達(dá)，紅參注射

3、液和麥冬注射液能誘導(dǎo)CYP2C的表達(dá)，紅參注射液對(duì)CYP3A的表達(dá)無(wú)影響。參麥注射液對(duì)大鼠CYP2B、2C的誘導(dǎo)作用在酶活性水平和mRNA轉(zhuǎn)錄水平具有一致性，紅參注射液對(duì)CYP3A在酶活性和mRNA水平都體現(xiàn)出抑制的趨勢(shì)，麥冬注射液對(duì)CYP2C的誘導(dǎo)作用在酶活性及mRNA水平也均有體現(xiàn)。參麥注射液及其各單藥對(duì)CYP450同工酶不同程度的誘導(dǎo)或抑制作用，提示當(dāng)藥物聯(lián)合應(yīng)用時(shí)應(yīng)關(guān)注可能產(chǎn)生的藥物間相互作用。
　　參麥注射液對(duì)心臟組織P

4、450酶mRNA表達(dá)水平檢測(cè)顯示:與空白組比較，除CYP281、CYP4A3和CYP4F6，參麥注射液對(duì)其他CYP各亞型mRNA的表達(dá)均表現(xiàn)了上調(diào)的作用，紅參注射液組對(duì)CYP2E1、 CYP4A3、 CYP4F1和 EHPX2 mRNA表達(dá)有上調(diào)作用，麥冬注射液對(duì)ANP、BNP和EHPX2 mRNA的表達(dá)上調(diào)作用明顯，同時(shí)能顯著下調(diào)CYP281和CYP2C11的表達(dá)。雖然參麥注射液對(duì)CYP281的作用沒(méi)有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義，但總體呈現(xiàn)出誘導(dǎo)的趨

5、勢(shì)，而麥冬注射液對(duì)CYP2B1呈現(xiàn)顯著的抑制作用，提示紅參注射液對(duì)CYP281的誘導(dǎo)作用更強(qiáng)。參麥注射液、紅參注射液與麥冬注射液均對(duì)CYP2E1、CYP4F1和EHPX2有誘導(dǎo)作用，提示參麥注射液對(duì)CYP2E1、CYP4F1和EHPX2的誘導(dǎo)作用可能由復(fù)方中的紅參和麥冬共同貢獻(xiàn)。參麥注射液和麥冬注射液對(duì)ANP和BNP均具有誘導(dǎo)的作用，提示在對(duì)ANP和BNP的作用中麥冬比紅參的作用更強(qiáng)。同時(shí)參麥注射液對(duì)心血管疾病療效明確，可能與其對(duì)CYP

6、2J3、ANP和BNP等調(diào)節(jié)作用較強(qiáng)相關(guān)。細(xì)胞實(shí)驗(yàn)水平得到了進(jìn)一步的進(jìn)一步的驗(yàn)證，參麥注射液對(duì)大鼠H9c2心肌細(xì)胞的CYP2J3、CYP2C11、ANP和BNP均具有明顯的誘導(dǎo)趨勢(shì)。
　　為了更加全面的研究參麥注射液對(duì)P450酶的影響，選取麥冬中的有效成分麥冬皂苷D，并以執(zhí)行心臟P450酶系統(tǒng)中執(zhí)行重要生理功能的CYP2J3進(jìn)行進(jìn)一步研究。考察麥冬皂苷D對(duì)大鼠H9c2心肌細(xì)胞CYP2J3的影響，分別檢測(cè)麥冬皂苷D作用細(xì)胞后CYP2

7、J3mRNA、蛋白水平以及下游產(chǎn)物14-15EETs變化。結(jié)果顯示:在，麥冬皂苷D對(duì)CYP2J3 mRNA表達(dá)和蛋白表達(dá)均有明顯的上調(diào)作用并呈現(xiàn)濃度依賴性(P＜0.05)，。ELISA實(shí)驗(yàn)檢測(cè)顯示麥冬皂苷D能增加大鼠H9c2心肌細(xì)胞中EETs的含量，提示麥冬皂苷D可能通過(guò)上調(diào)CYP2J3使心肌細(xì)胞中EETs的含量增加。
　　綜上所述，參麥注射液對(duì)大鼠肝臟、心臟CYP450酶各亞型顯示了誘導(dǎo)或抑制的作用，當(dāng)臨床需要與其他藥物聯(lián)合應(yīng)用