生脈注射液誘導心肌組織內干細胞分化與體外循環(huán)心肌保護.pdf

1、以往認為,心臟為終末分化器官,其細胞本身不具有增殖分化功能,因此無法修復損傷心肌。但隨著細胞生物學技術的進步以及人們研究的深入,心臟中存在心肌干細胞(CSC)的觀念已經越來越多地為醫(yī)學工作者們所接受。本研究將含不同濃度生脈注射液的培養(yǎng)基用于培養(yǎng)心肌組織來源細胞,觀察該藥能否在體外誘導心肌組織內干細胞分化,并通過臨床試驗進一步證實生脈注射液具有減輕心肌缺血-再灌注損傷的作用,同時探討其體外循環(huán)心肌保護作用是否與誘導心肌組織內干細胞分化存在

2、關聯。
　　 第一部分生脈注射液促進人心肌組織內干細胞分化為心肌細胞的體外實驗
　　 目的:成功培養(yǎng)人心肌組織來源細胞,嘗試提取人CSC,觀察生脈注射液是否具有誘導干細胞分化的作用,為后期的臨床研究奠定基礎;
　　 方法:選擇行心臟手術的病人,將術中切除的心肌組織保留,用組織塊消化法提取細胞,通過體外擴增后用免疫磁珠法分選人心肌組織來源干細胞,并嘗試用不同濃度生脈注射液干預細胞,利用免疫熒光的方法檢測心肌特異性轉

3、錄因子和心肌特異性蛋白,進一步驗證生脈注射液的誘導干細胞分化作用;
　　 結果:從人心肌組織中成功提取細胞,并在體外擴增,但未能成功分選人CSC,免疫熒光法證實5μl/ml和10μl/ml生脈注射液可以誘導心肌組織內干細胞分化,濃度增大后誘導效率稍有下降;
　　 結論:適當濃度的生脈注射液可以誘導心肌組織內干細胞分化為心肌細胞,但由于CSC本身含量極低,因此未能成功將其分選出來。
　　 第二部分生脈注射液在體外循

4、環(huán)心肌保護中的作用
　　 目的:通過臨床研究,證實生脈注射液可以減輕體外循環(huán)誘發(fā)的缺血再灌注損傷,觀察體內試驗中生脈注射液是否可以誘導心肌組織內干細胞分化為心肌組織;
　　 方法:選擇行心臟手術的病人,分別選擇術前、術中及術后的六個時間點抽取血液,檢測血清中SOD、MDA、cTnI和CK-MB水平,術中切除小塊心肌組織,用免疫熒光的方法檢測其中心肌特異性轉錄因子(GATA4、Nkx2.5)和特異性蛋白(Cx43、cTnI

5、);
　　 結果:入院時兩組患者血清SOD活力、MDA水平無明顯差異,而手術開始時試驗組血清SOD活力顯著高于對照組,術后一天時試驗組血清MDA水平顯著低于對照組,而試驗組和對照組血清cTnI和CK-MB水平有顯著差異;試驗組GATA-4和NKx2.5熒光強度顯著強于對照組,試驗組的cTnT和Cx43仍然趨向較強的熒光信號,但無顯著統(tǒng)計學差異;
　　 結論:生脈注射液可以增強血清中SOD活力及減少脂質過氧化反應,抑制體外

6、循環(huán)過程中的缺血再灌注損傷,而心肌組織內干細胞分化為心肌細胞可能也參與了體外循環(huán)心肌保護。
　　 第三部分我國大陸地區(qū)主動脈夾層發(fā)病特征——文獻綜合分析及與主動脈夾層國際注冊研究資料進行對比
　　 目的:急性主動脈夾層(AAD)是一種致死率和致殘率高的臨床急癥。為了加深對該病的認識,提高診治水平,國際主動脈夾層注冊研究(IRAD)于1996年成立。中國大陸(MC)是世界上人口最多的地區(qū),每年新發(fā)AAD病人越來越多,由于I

7、RAD病例均來源于發(fā)達的西方國家,醫(yī)療體制、經濟發(fā)展水平和人種都與MC有所不同,因此該病在IRAD和MC兩個群體之間的差異可能被忽略。
　　 方法:我們通過檢索PubMed數據庫和中國全文期刊數據庫,通過一定的標準,分別選取了來自IRAD和MC的臨床報告,以求助或者購買來獲得全文。根據數據性質不同,分別采用t檢驗、卡方檢驗或Fisher精確概率計算等方法進行統(tǒng)計,所有統(tǒng)計過程應用SPSS13.0軟件進行。
　　 結果:來

8、自MC的AAD病人較IRAD組病人顯著年輕,且前者中男性病人比例也高于后者(80.7％vs68.6％,P＜0.001)。中國病人更可能出現非典型癥狀和體征。與IRAD相比,中國醫(yī)師更愿意選擇磁共振來進行.AAD的診斷(45.5％vs11.6％,P＜0.001)?？傮w上來說,兩組住院期間死亡率類似,但是由于研究方法的限制,相當一部分來自MC的病例未能參與統(tǒng)計,并且中國病人接受治療的比例也較低。
　　 結論:通過初步觀察和分析,我們