大豆、咖啡豆、人α-蘭乳糖苷酶基因結(jié)構(gòu)和功能的比較.pdf_第1頁
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文檔簡介

1、該文利用RT-PCR技術(shù)克隆了大豆α-半乳糖苷酶cDNA,設(shè)計(jì)并合成帶有EcoRI酶切位點(diǎn)的5'端引物進(jìn)行PCR,產(chǎn)物與畢赤酵母表達(dá)載體pPIC9連接構(gòu)建大豆的基因重組α-半乳糖苷酶表達(dá)質(zhì)粒,以相似的方法構(gòu)建基因重組人α-半乳糖苷酶表達(dá)質(zhì)粒.基因重組的大豆α-半乳糖苷酶可在畢赤酵母中高效分泌表達(dá),表達(dá)產(chǎn)物通過離子交換層析進(jìn)行純化;而基因重組的人α-半乳糖苷酶表達(dá)量相對較低,產(chǎn)物經(jīng)硫酸銨沉淀和凝膠過濾層析進(jìn)行純化.通過對大豆、咖啡豆、人α

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