基于治未病理論的“正常體質(zhì)-腎虛體質(zhì)-腎虛證候”唾液動(dòng)態(tài)變化研究.pdf

1、目的:比較“正常體質(zhì)——腎虛體質(zhì)——腎虛證候”動(dòng)態(tài)演變過程中唾液生化指標(biāo)及代謝組的變化，尋找腎藏象相關(guān)疾病發(fā)生發(fā)展過程中可能的生物標(biāo)志物，探索其預(yù)防靶標(biāo)，為臨床開展相關(guān)疾病無創(chuàng)傷診斷技術(shù)和早期防治研究奠定基礎(chǔ)。
　　方法:12只孕鼠，隨機(jī)分為Ⅰ、Ⅱ兩組，其中Ⅰ組6只孕鼠孕期不恐嚇，正常喂養(yǎng)，分娩后隨機(jī)抽取20只仔鼠作為正常對照組和腎虛證候模型組，每組10只，均為雌雄各半。Ⅱ組6只孕鼠根據(jù)“恐傷腎”的理論，采用“貓嚇鼠”的刺激方法，

2、從妊娠第2天開始給予恐嚇直到仔鼠出生，由此使仔鼠先天不足，制作先天不足腎虛體質(zhì)動(dòng)物模型。隨機(jī)抽取10只雌雄各半仔鼠作為腎虛體質(zhì)模型組。各組仔鼠正常條件喂養(yǎng)6周后，腎虛證候模型組每只每天肌肉注射氫化可的松25mg/kg體重，正常對照組和腎虛體質(zhì)模型組注射等量的生理鹽水，連續(xù)10天。造模結(jié)束稱重后停藥，所有動(dòng)物乙醚麻醉，腹腔注射0.2％匹魯卡品促進(jìn)唾液分泌，收集大鼠唾液，進(jìn)行PH值檢測，生化指標(biāo)檢測及UPLC-TOF-MS代謝組學(xué)檢測。大鼠

3、腮腺進(jìn)行病理組織學(xué)觀察。
　　結(jié)果:①一般狀況:正常對照組大鼠皮毛色白光亮潤澤，反應(yīng)靈敏，飲、食、尿量正常，活動(dòng)正常。腎虛體質(zhì)模型組仔鼠表現(xiàn)為體積較小，體重明顯輕于其他組（P＜0.05）。身長相對較短，毛發(fā)稀疏，易驚，食量較小，與腎虛體質(zhì)判斷依據(jù)相符。腎虛證候模型組大鼠注射氫化可的松后出現(xiàn)體重減輕、活動(dòng)明顯減少、食量下降，反應(yīng)遲鈍、卷曲拱背和體毛稀疏枯黃等癥狀，個(gè)別出現(xiàn)掉毛現(xiàn)象，與腎虛證候判斷依據(jù)相符。第八周腎虛體質(zhì)組與腎虛證候組

4、大鼠體重均低于正常對照組，有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.05）。②與正常對照組比較，腎虛體質(zhì)組、腎虛證候組大鼠唾液PH值均明顯升高，差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＜0.05)。腎虛證候組與腎虛體質(zhì)組比較無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。③大鼠唾液生化指標(biāo)檢測發(fā)現(xiàn)，與正常對照組相比，腎虛體質(zhì)組大鼠唾液CK、ALT、AST、ALP、TP等降低，K、P、AMY等升高，差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.05），腎虛證候組大鼠CL、CK、ALT、AST、ALP、TP等降低，K、P、AMY

5、等升高，差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＜0.05)。④大鼠唾液腮腺組織病理學(xué)檢測顯示，與正常對照組腮腺病理組織相比較，腎虛體質(zhì)組腮腺組織漿液腺泡不同程度變形，腺泡排列紊亂，腺細(xì)胞內(nèi)分泌顆粒減少，閏管減少或消失。腎虛證候組腮腺組織小葉間隔增大，腺泡體積減小，腺細(xì)胞胞質(zhì)濃縮，基底紋模糊。⑤大鼠唾液UPLC-TOF-MS代謝組學(xué)檢測結(jié)果顯示，與正常對照組比較，腎虛體質(zhì)組唾液中α-亞麻酸、γ一亞麻酸、十八碳三烯酸含量升高，腎虛證候組大鼠唾液中環(huán)磷酰胺含

6、量升高，二十碳五烯酸含量下降，二高γ一亞麻酸含量下降。與腎虛體質(zhì)組相比，腎虛證候組大鼠唾液酪氨酸酶含量升高。這些物質(zhì)可能為腎藏象相關(guān)疾病發(fā)生發(fā)展過程中的生物標(biāo)志物。
　　結(jié)論:伴隨著“正常體質(zhì)——腎虛體質(zhì)——腎虛證候”動(dòng)態(tài)演變過程，唾液PH值、生化指標(biāo)、代謝物及腮腺病理組織均發(fā)生了相應(yīng)的變化，說明在腎臟不同的生理病理狀態(tài)下，唾液會(huì)隨之發(fā)生變化，進(jìn)一步闡釋了“腎在液為唾”理論的科學(xué)內(nèi)涵，也為尋找疾病發(fā)生發(fā)展過程中可能的生物標(biāo)志物，探